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大量
- 英文名:
jetPEI® DNA transfection, HTS application
- 供应商:
北京百奥创新科技有限公司
- 保存条件:
在5°C±3°C的温度下储存jetPEI®
- 规格:
1 mL;4 x 1 mL
Polyplus DNA转染试剂jetPEI® (101000053)
产品简介:
jetPEI®转染试剂是一种线性聚乙烯亚胺衍生物,不含动物来源的成分,可向粘附细胞和悬浮细胞提供高效且可重复的基因递送。因此,jetPEI®转染试剂特别适合自动化或手动HTS(高通量筛选),有三种方案可供选择:反向、分批和正向。
一、3种方案可供选择
在正向方案中,细胞在转染前一天分裂,并将jetPEI®/DNA复合物添加到粘附细胞或悬浮细胞中。
当转染基因库(如DNA文库)时,反向方案是最合适的(图1)。在该方案中,在加入细胞之前,将jetPEI®/DNA复合物制备或沉积在孔中。配合物可稳定长达4小时(图2)。
已经开发了分批处理方案来制备转染细胞的均匀池。为此,细胞在胰蛋白酶消化后立即转染,同时仍处于悬浮状态。该方案优选用于药物筛选应用,并允许快速处理,比正向方案快一天。

图1:jetPEI®HTS应用的反向转染方案
二、强大的转染复合物
与基于脂质的试剂和磷酸钙相比,水溶性聚合物jetPEI®和DNA形成的复合物可以有效转染长达4小时。因此,它们允许有足够的时间将复合物分配到板中(图2)。

图2:复合物形成孵育时间对jetPEI®转染效率的影响。按照反向转染方案,用pCMVLuc和jetPEI®在96孔板中转染HEK-293细胞。24小时后测定萤光素酶活性。
三、批间再现性
使用jetPEI®的HTS DNA转染从一批到另一批具有高度一致的转染效率(图3)。

图3:使用jetPEI®的批次间再现性。对于每批,使用24孔板的标准方案,在血清存在下一式三份转染HeLa细胞。
四、适用于多种细胞类型
jetPEI®成功地将基因递送到各种粘附和非粘附细胞系以及原代细胞(表1)。Polyplus转染试剂jetPEI®在550多种出版物中出现。此外,Polyplus的在线数据库为400多个细胞系和原代细胞提供了特定的转染条件。

表1:使用jetPEI®成功转染的一些常见细胞系和原代细胞。
五、优异的转染结果
将jetPEI®与其他几种流行的转染试剂进行比较(图4)。jetPEI®被发现提供了最佳性能:高效率和低可变性(小标准偏差)。

图4:一系列商业试剂的转染效率。根据制造商的方案,在10%血清存在的情况下,使用1µg pCMV萤光素酶在24孔板中转染HeLa细胞。转染后24小时测量萤光素酶的表达。
产品属性:
| 产品名称 |
jetPEI® |
| 递送分子 |
DNA |
| 应用 |
质粒转染、高通量筛选(HTS) |
| 细胞类型 |
粘附细胞和悬浮细胞 |
| 转染次数 |
在96孔板中,1mL jetPEI®可转染2000次 |
| 储存 |
在5°C±3°C的温度下储存jetPEI® |
产品应用:Polyplus的jetPEI®试剂非常适合质粒DNA转染,尤其是高槽点筛选(HTS)应用。
产品优势:
★ 非常适合贴壁细胞和悬浮细胞
★ HTS细胞转染的快速有效方法
★ 与血清和抗生素兼容
★ 异常可重复的结果
★ 提供反向、批处理和正向方案
产品信息:
| 货号 |
产品名称 |
NaCl量 |
| 101000053 |
jetPEI® 1 mL |
50 ml |
| 101000020 |
jetPEI® 4 x 1 mL |
4 x 50 ml |
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文献和实验实验试剂 Dynal® magnet: see www.invitrogen.com/magnets-selection. Sterile, round-bottomed 2 ml microcentrifuge tubes. Micropipettors and sterile, disposable pipette tips. 65°C water-bath or heating block
Extraction of DNA using DNAzol® Reagent
pipette tips by cutting 2-3 mm from the ends of plastic pipette tips. Mix DNA solutions by inversion; avoid shaking or use of a Vortex for mixing. Homogenization of tissues: Homogenize tissue samples in a hand-held glass/Teflon® homogenizer
E.Z.N.A.® Mag-Bind® Viral DNA/RNA Spin Protocol
实验原理 If using the E.Z.N.A.™ Mag-Bind® Viral DNA/RNA Kit for the first time, please read this booklet to become familiar with the procedure and its various modification. Samples are lysed in a specially formulated buffer
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