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- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件:
室温
- 保质期:
一年
- 英文名:
Tissue Cells DNA/RNA/microRNA/Protein Extraction & Isolation Kit
- 库存:
710
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格:
50次
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括北京现货DNA/RNA/蛋白分离纯化试剂盒优惠在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:北京现货DNA/RNA/蛋白分离纯化试剂盒优惠
编号:ALH068
规格:50次
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
英文名:Tissue Cells DNA/RNA/microRNA/Protein Extraction & Isolation Kit
本试剂盒用于快速从同一个动物细胞或者组织样品中同时提取分离基因组DNA和包括miRNA的总RNA和Protein(如购买额外miRNA吸附柱子和配套溶液,还可以将同一个样品的总RNA和miRNA分离并提取,富集miRNA。)。独特的裂解液迅速裂解细胞和灭活细胞RNA/DNA酶,然后裂解混合物RNA/miRNA/DNA/Protein同时通过一个基因组DNA吸附柱,基因组DNA被吸附而miRNA/RNA/Protein穿透滤过。DNA吸附柱上基因组DNA经过一系列漂洗-离心后洗脱得到纯净基因组DNA。滤过的miRNA/RNA用乙醇调节结合条件后,miRNA/RNA在高离序盐状态下选择性吸附于miRNA/RNA吸附柱上,再通过一系列快速的漂洗-离心洗脱得到纯miRNA/RNA。滤液经选择性沉淀得到Protein。无苯酚、氯*(代"仿")DNA/RNA快速提取技术基础上配合独特的分离技术同时得到的miRNA/RNA/基因组DNA纯度高,互不干扰。得到的miRNA/RNA不需要DNase消化,可直接用于反转录PCR、荧光定量PCR等实验。基因组DNA也可以直接用于下游的Southern、酶切、PCR等各种试验。
产品组分:
裂解液RLT Plus————50ml
Wash Solution 1————12ml
Wash Solution 2/3————10ml
RNase-free H2O—————10ml
抑制物去除液————25ml
漂洗液————————15ml
缓冲液————————60ml
洗脱缓冲液——————10ml
基因组DNA吸附柱和收集管————50套
RNA吸附柱和收集管————50套
产品特点:
1. 完全不使用有毒的苯酚,氯*(代"仿")等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
2. 快速,简捷,单个样品miRNA/RNA/基因组DNA/Protein分离操作一般可在1小时内完成。
3. 独特吸附柱和配方确保有效清除基因组DNA残留,一般情况下得到的miRNA/RNA不需要DNase消化可直接 用于反转录PCR、荧光定量PCR等实验。
4. 多次柱漂洗确保miRNA/RNA/基因组DNA高纯度,可直接用于下游各种实验。
注意事项:
1. 所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2. 样品处理量绝对不要超过基因组吸附柱和RNA吸附柱处理能力,否则造成DNA残留或者产量降低。不同组织细胞种类RNA/DNA相差极大,例如胸腺脾脏DNA含量丰富,超过5mg就会超过柱子处理能力。COS细胞RNA含量丰富,超过3×106细胞就会超过柱子吸附能力。所以开始摸索实验条件时,如果不清楚样品DNA/RNA含量时宁可使用较少的样品处理量,如细胞不超过3~4×106,组织不超过10mg。将来根据样品试验情况增加或者减少处理量。
3. 裂解液RLT Plus 、抑制物去除液IR、Wash solution 1、Wash solution 2/3中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
4. 该试剂盒如需要用于植物样品尤其是多糖多酚次级代谢产物丰富的困难样品的DNA/miRNA/RNA提取,请咨询技术人员,可能需要用到其它试剂。
5. 如购买额外miRNA吸附柱子和配套溶液,还可以将同一个样品的总RNA和miRNA分离并提取,富集miRNA。请咨询我们。
6. 关于DNA 的微量残留:
一般说来任何总RNA提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA的微量残留(DNase消化也无法做到100%无残留), 本试剂盒,由于采取了本公司独特的缓冲体系和基因组DNA 分离清除技术,绝大多数DNA已经被清除,不需要DNase消化,可直接用于反转录PCR和荧光定量PCR。个别特殊情况如DNA含量过于丰富造成残留或者要进行严格的mRNA表达量分析荧光定量PCR,我们建议在进行模板和引物的选择时:
1) 选用跨内含子的引物,以穿过mRNA 中的连接区,这样DNA就不能作为模板参与扩增反应。
2) 选择基因组DNA和cDNA上扩增的产物大小不一样的引物对。
储存条件:室温,有效期一年。
本品别名:细胞组织DNA/RNA/蛋白分离纯化提取试剂盒|组织细胞DNA/RNA/蛋白分离提取试剂盒|组织细胞DNA/RNA/蛋白分离纯化试剂盒|组织细胞核酸与蛋白分离纯化试剂盒|组织细胞蛋白/DNA/RNA/分离提取试剂盒
欲了解更多北京现货DNA/RNA/蛋白分离纯化试剂盒优惠的品牌、产地、价格及说明书等产品信息,请致电北京百奥莱博科技有限公司,我们将竭诚为您服务,另外,以下产品正在火爆促销:
·柱式质粒大量提取试剂盒
编号:ALH088
英文名称:A large number of Plasmid Extraction Kit (centrifugal column type)
规格:10次
本试剂盒适用于大规模高纯度质粒制备。采用改进SDS-碱裂解法裂解细胞,离心吸附柱内的硅基质膜在高盐、低pH值状态下选择性地结合溶液中的质粒DNA,再通过漂洗液将杂质和其它细菌成分去除,最后低盐、高pH值的洗脱缓冲液将纯净质粒DNA从硅基质膜上洗脱。
试剂盒组份(10次):
RNaseA(10mg/ml)-————————0.75ml
溶液P1—————————————75ml
溶液P2—————————————75ml
溶液P3—————————————110ml
漂洗液WB————————————50ml
洗脱缓冲液EB——————————20ml
吸附柱和收集管(50ml)——————10套
试剂盒特点:
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.不需要使用有毒的苯酚、氯*(代"仿")等试剂,也不需要乙醇沉淀。快速、方便,从100-200ml大肠杆菌LB((Luria-Bertani)培养液中,可快速提取0.2-0.5mg纯净的高拷贝质粒DNA,提取率达80 %左右。
3.获得的质粒产量高、超螺旋比例高、纯度好,可以直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序等各种分子生物学实验。
注意事项
1. 所有的离心步骤如未加另外说明均在室温完成,使用转速可以达12000g,带50ml转头的台式离心机。
2. 溶液P3中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤、眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
3. 提取质粒的量与细菌培养浓度、质粒拷贝数等因素有关。如果所提质粒为低拷贝质粒或大于10kb 的大质粒,应加大菌体使用量,同时按比例增加P1、P2、P3的用量,洗脱缓冲液应在70℃预热。可以适当的延长吸附和洗脱的时间,提高提取效率。
4. 得到的质粒DNA可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。OD260值为1相当于大约50μg/ml DNA。电泳可能为单一条带,也可能为2条或者多条DNA条带,这主要是不同程度的超螺旋构象质粒泳动位置不一造成,与提取物培养时间长短、提取时操作剧烈程度等有关。本公司产品正常操作情况下基本超螺旋可以超过90%。
5. 质粒DNA确切分子大小,必须酶切线性化后,对比DNA分子量Marker才可以知道。处于环状或者超螺旋状态的质粒,泳动位置不确定,无法通过电泳知道其确切大小。
6. 洗脱液EB不含有螯合剂EDTA,不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱, 但应该确保pH大于7.5,pH过低影响洗脱效率。用水洗脱,质粒应该保存-20℃。质粒DNA如果需要长期保存,可以用TE缓冲液洗脱(10mM Tris-HCl,1mM EDTA,pH 8.0),但是EDTA可能影响下游酶切反应,使用时可以适当稀释。
储存条件:室温,有效期12个月。
北京现货DNA/RNA/蛋白分离纯化试剂盒优惠关键词:组织细胞DNA/RNA/蛋白分离提取试剂盒,组织细胞DNA/RNA/蛋白分离纯化试剂盒,细胞组织DNA/RNA/蛋白分离纯化提取试剂盒,组织细胞核酸与蛋白分离纯化试剂盒
·植物RNA大提试剂盒
编号:ALH040
英文名称:Plant RNA Extraction Kit
规格:10次
本试剂盒适用于植物组织细胞总RNA快速大量提取。使用独特的裂解液/β-巯基乙醇迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶,植物RNA助提剂帮助结合多糖多酚并通过离心去除,然后用乙醇调节结合条件后,RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤, 去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质去除, 最后低盐的RNase free H20将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。
本试剂盒特点:
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.不需要使用有毒的苯酚,氯*(代"仿")等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
3.快速,简捷,单个样品操作一般可在60分钟内完成。
4.独特的植物RNA助提剂可以有效结合多糖多酚,提高清除效果。
5.多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.9~2.0,基本无DNA残留,可用于RT-PCR,Northern-blot和各种实验。
试剂盒组份:
| 组份 | 10次 |
| 裂解液RLT | 100 ml |
| 去蛋白液RW1 | 120 ml |
| 漂洗液RW | 25ml×2 |
| RNase-freeH2O | 10ml |
| PLANTbalb | 10ml X 2 |
| 吸附柱和收集管 | 10套 |
注意事项
1. 所有的离心步骤均可在室温完成,使用可容纳50ml 离心管的离心机。
2. 需要自备乙醇, β-巯基乙醇,一次性注射器(可选),研钵。
3. 裂解液RLT 和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
4. 植物组织裂解是否充分直接影响到RNA 提取的质量和产量,本试剂盒中提供的裂解液RLT,主要成分为异硫氰酸胍,适用于大多数植物组织的裂解,但有些植物组织(例如玉米的乳白色胚乳)或丝状真菌,由于次级代谢产物较特殊,异硫氰酸胍使样品产生固化,导致RNA 无法提取,此时可以向我们索取另一种裂解液RLC,将解决该问题。
5. 关于DNA 的微量残留:
一般说来任何总RNA提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA 的微量残留,本试剂盒RNA提取产品,由于采取了本公司独特的缓冲体系和选择了特殊吸附能力的吸附膜,在大多数RT-PCR 扩增过程中极其微量的DNA 残留(一般电泳EB 染色紫外灯下观察不可见)影响不是很大, 如果要进行严格的mRNA 表达量分析如荧光定量PCR,我们建议在进行模板和引物的选择时:
1) 选用跨内含子的引物,以穿过mRNA中的连接区,这样DNA就不能作为模板参与扩增反应。
2) 选择基因组DNA和cDNA上扩增的产物大小不一样的引物对。
3) 将RNA提取物用RNase-free的DNase I 处理。本试剂盒还可以用于DNase I处理后的RNA清洁,请联系我们索取具体操作说明书。
4) 在步骤去蛋白液RW1漂洗前,直接在吸附柱上进行DNase I处理。请联系我们索取具体操作说明书。
6. RNA 纯度及浓度检测:
完整性: RNA 可用普通琼脂糖凝胶电泳(电泳条件:胶浓度1.2%;0.5×TBE 电泳缓冲液;150v,15 分钟)检测完整性。由于细胞中70%-80%的RNA 为rRNA,电泳后UV 下应能看到非常明显的rRNA 条带。动物rRNA 大小分别约为5 kb 和2kb,分别相当于28S 和18S rRNA。动物RNA 样品中最大rRNA 亮度应为次大rRNA 亮度的1.5-2.0 倍,否则表示RNA 样品的降解。出现弥散片状或条带消失表明样品严重降解。
纯度:OD260/OD280 比值是衡量蛋白质污染程度的指标。高质量的RNA,OD260/OD280 读数(10mMTris, pH7.5)在1.8-2.1 之间。OD260/OD280 读数受测定所用溶液的pH 值影响。同一个RNA 样品,假定在10mM Tris,pH7.5 溶液中测出的OD260/OD280 读数1.8-2.1 之间,在水溶液中所测读数则可能在1.5-1.9之间,但这并不表示RNA 不纯。
浓度:取一定量的RNA 提取物,用RNase-free 水稀释n 倍,用RNase-free 水将分光光度计调零,取稀释液进行OD260, OD280 测定,按照以下公式进行RNA浓度的计算:终浓度(ng/μl)= (OD260)×(稀释倍数n)×40
储存条件:室温,有效期6个月。
北京现货DNA/RNA/蛋白分离纯化试剂盒优惠关键词:组织细胞DNA/RNA/蛋白分离提取试剂盒,组织细胞DNA/RNA/蛋白分离纯化试剂盒,细胞组织DNA/RNA/蛋白分离纯化提取试剂盒,组织细胞核酸与蛋白分离纯化试剂盒
·病毒基因组快速提取试剂盒
编号:ALH048
英文名称:Nucleic acid rapid extraction from virus
规格:50次
本试剂盒采用特异性结合病毒DNA/RNA 的离心吸附柱和独特的缓冲液系统,病毒DNA/RNA提取试剂盒适合于从无细胞体液,包括血浆、血清、腹水、培养细胞上清液、脑脊髓液及尿液等中快速提取高纯的病毒DNA/RNA。该产品可以满足绝大多数的病毒RNA/DNA的同时提取要求, 如病毒RNA:HCV(丙肝病毒),HIV(艾滋病毒),和HTLV(人类嗜T淋巴细胞病毒); 病毒DNA:HBV(乙肝病毒)和CMV(巨细胞病毒)等等。病毒裂解后,DNA/RNA后在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,将盐、细胞代谢物、蛋白等杂质去除,最后低盐的洗脱缓冲液将纯净的病毒DNA/RNA从硅基质膜上洗脱。纯化后的病毒核酸无杂质和PCR抑制剂,可直接适用于PCR/RT-PCR分析。
试剂盒组分:
裂解液VLB————————20 ml
去蛋白液RE———————25 ml
漂洗液RW————————10 ml
RNase-free H2O—————10 ml
吸附柱和收集管————50套
产品特点:
1.不需要使用有毒的苯酚等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
2.节省时间,简捷,单个样品操作一般可在20分钟内完成。
3.多次柱漂洗确保高纯度,提取的病毒DNA/RNA 纯度高,质量稳定可靠,可适用于各种常规操作,包括PCR/RT-PCR、酶切、测序、Southern 杂交等。
操作步骤:
提示:第一次使用前请先在10ml 漂洗液RW 中加入40ml 无水乙醇,充分混匀,加入后请及时在方框打钩标记已加入乙醇,以免多次加入!
1. 200μl 血清等体液(需回复到室温,不足可用0.9% NaCl 或者PBS 补足)转入上述1.5ml 离心管,加入400μl 裂解液VLB, 立刻涡旋振荡充分混匀。
2. 室温(15-25℃)放置10 分钟,每隔5 分钟,振荡混匀一次。
3. 加入450μl 无水乙醇,立刻涡旋振荡充分混匀。如果周围环境高于25℃,乙醇需要冰上预冷后再加入。
4. 将上述混合物加入一个吸附柱 中,(吸附柱放入收集管中)13,000rpm 离心30-60 秒,倒掉收集管中的废液。如果总体积超过750μl,可分两次将溶液加入同一个吸附柱中。
5. 加500μl 去蛋白液RE,12,000rpm 离心30 秒,弃废液。
6. 加入500μl 漂洗液RW(请先检查是否已加入无水乙醇!),12,000rpm 离心30 秒,弃废液,加入500μl 漂洗液RW,重复一遍。
7. 将吸附柱 放回空收集管中,13,000rpm 离心2 分钟,尽量除去漂洗液, 以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。
储存条件:室温,有效期12个月。
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