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小鼠Gsk3b过表达慢病毒转染实验
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小鼠Gsk3b过表达慢病毒转染实验
GSK3b; 糖原合成酶激酶 3β
Glycogen synthase kinase 3 (GSK3) is a proline directed serine threonine kinase that was initially identified as a phosphorylating and inactivating glycogen synthase. GSK3 has been implicated in fundamental cell processes such as cell fate determination,metabolism, transcriptional control and oncogenesis. Two isoforms, alpha (GSK3A) and beta, show a high degree of amino acid homology within their catalytic domains. GSK3B is involved in energy metabolism, neuronal cell development and body pattern formation。
可提供一站式服务含病毒载体构建、病毒包装、细胞转染、建系(流式分选或者药物筛选)、PCR及WB验证、细胞功能实验、动物实验
可提供一站式服务含病毒载体构建(3对引物)、外筛成功、病毒包装、细胞转染、建系(流式分选或者药物筛选)、PCR及WB验证、细胞功能实验、动物实验。
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文献和实验目前慢病毒载体主要应用在以下几个方面: 细胞基因治疗(截止目前,已上市的 CAR-T 产品有 9 款采用了慢病毒载体递送 CAR 基因) 基因表达调控(过表达、RNA 干扰研究等) 基因编辑(CRlSPR/Cas9 gRNA 文库筛选、基因敲除、敲入、点突变、基因激活/抑制) 稳转细胞株构建 活体细胞成像追踪 转基因动物 图 1 慢病毒载体的主要应用方向 应用案例 案例 1:用慢病毒载体进行基因过表达,构建稳转细胞株,研究葡萄糖激酶在前列腺癌(PCa)中的作用[1] 细胞
一 miRNA成熟及作用方式(Mikhailidis DP, Athyros VG. Nat Rev Cardiol. 2014 Feb;11(2):72-4.) miRNA过表达:将miRNA前体序列构建入病毒载体中,该载体既可用于瞬时转染细胞,也可以包装成病毒用于稳定株筛选和动物水平过表达miRNA。 miRNA敲低:设计针对miRNA的TuD RNA封闭片段或海绵片段,再将该片段构建入病毒载体中。该载体除了可以直接瞬时转染细胞用于miRNA的敲低,也可以包装成慢病毒,用于动物水平敲低miRNA
Cell Death Differ:中大五院黄曦团队发现新冠病毒引起肺损伤的分子机制
共沉淀和线粒体胞质分离实验证实 SARS-CoV-2 M 蛋白和 BCL-2 家族蛋白促凋亡分子 BOK 相互作用,抑制 BOK 泛素化降解,并促进 BOK 发生线粒体转位(图 2)。BOK 主要通过 BH2 结构域与 M 蛋白结合。 图片来源:Cell death & differentiation 对小鼠进行气管暴露注射表达 M 蛋白慢病毒的实验表明,M 蛋白会导致小鼠肺上皮细胞凋亡和脱落,肺通透性增强和产生肺水肿,敲低 BOK 能减轻 M 蛋白导致小鼠肺部损伤(图 4)。 图片来源:Cell
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