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- KALANG
- 中国大陆
- KL012
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
2～8℃
- 保质期：
长期
- 英文名：
Mammalian Genomic DNA extraction kit
- 库存：
大量
- 供应商：
康朗生物
- 规格：
50次
哺乳动物基因组DNA抽提试剂盒
英文名：Mammalian Genomic DNA extraction kit编号：KL012
规格：50次
哺乳动物基因组DNA抽提试剂盒，采用了经典的蛋白酶K处理法，可以抽提到100-150kb以上的基因组DNA。
用本试剂盒抽提到的基因组DNA适用于Southern杂交、基因组DNA的PCR扩增及基因组DNA文库的构建等。
通常使用本试剂盒，从20毫克组织可以抽提到约40微克基因组DNA，从106-107Hela细胞可以抽提到约5-50微克基因组DNA。
本试剂盒足够抽提50个常规量的样品。
保存条件：
-20℃保存，一年有效。10M醋酸铵和NucleaseFreeWater也可以室温保存。
注意事项：
需自备Tris平衡苯酚、氯*(代"仿")和无水乙醇。
如果打算抽提到大片断的基因组DNA，则要尽量避免基因组DNA的物理性剪切。例如避免剧烈振荡含有基因组DNA的样品，可以用剪掉枪头尖的枪头吸取含有基因组DNA的样品。
不可过分干燥基因组DNA沉淀，否则会极难溶解。
使用说明：
1.样品收集
a)对于组织样品：
切下组织，并剪切成小块，置液氮中冻结，研碎或捣碎。
b)对于贴壁细胞：
胰酶消化后，PBS或生理盐水洗一次，1000-2000g离心1-2分钟，弃上清，收集细胞。
c)对于悬浮细胞：
1000-2000g离心1-2分钟，弃上清，收集细胞。
2.基因组DNA抽提
a)样品处理完毕后，每1毫升样品裂解液中加入5微升蛋白酶K，混匀。
b)对于上述处理好的样品，每20毫克组织或106-107个细胞中加入500微升添加了蛋白酶K的样品裂解液，颠倒混匀数次，充分裂解组织或细胞。
c)50℃水浴消化过夜。
d)加入500微升Tris平衡苯酚抽提样品。
e)吸出酚相及中间相(可以吸除少量靠近中间相的水相液体)，剩余的水相用等体积Tris平衡酚再抽提一次。
f)吸出酚相及中间相(可以吸除少量靠近中间相的水相液体)，剩余的水相用等体积氯*(代"仿")再抽提一次。
g)吸出约300微升上清液，加入60微升10M醋酸铵和600微升无水乙醇，颠倒数次混匀，此时可见DNA沉淀产生。
h)10,000g离心1分钟，弃上清。加入70%乙醇洗涤DNA沉淀两次。
i)尽量吸除残余的乙醇，待看不到明显的液体时，立即加入50-100微升NucleaseFreeWater溶解DNA。注意：不可过分干燥基因组DNA沉淀，否则会极难溶解。如果发现DNA沉淀难以溶解，可以在4℃用摇床缓慢摇动过夜，以溶解DNA沉淀。
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文献和实验生物学技术的不断发展和对人类血小板抗原基因结构研究的突破性进展，使血小板基因分型更为简捷准确。笔者采用PCR序列特异引物技术（PCR-SSP）对HPA-1～4这4个比较重要的血小板抗原系统进行了基因分型研究。1、材料与方法1.1 样本 25名健康献血者静脉采血0.5ml，ACD抗凝。1.2 基因组DNA抽提 采用蛋白酶K消化，酚/氯仿抽提DNA。1.3 引物 DNA序列特异性引物设计参照文献方法，一共12条，合成序列见表1。内对照为人类生长激素（HGH）基因特异性引物，序列：HGH-1s
血液基因组 DNA提取试剂盒操作指南（DP348） ——200μl~1ml 抗凝全血
以下操作按照天根产品 DP348 血液基因组 DNA 提取试剂盒的说明书进行，所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品，样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备：1. 抗凝血 200 μl~1ml抗凝全血2. 移液器及配套无菌枪头（200 μl ，1ml）3. 无水乙醇4. 涡旋振荡器，金属浴/水浴，台式离心机备注：本实验以人血为例，如提取哺乳动物全血可以用此流程，如果禽类、鸟类、两栖类或更低级生物的抗凝血液，红细胞有核细胞，因此处理量为5-20 μl，当处理
血液基因组 DNA 提取试剂盒操作指南（DP349） ——小体积全血操作流程（600 μl 以内血样)
以下操作按照天根产品 DP349 血液基因组 DNA 提取试剂盒的说明书进行，所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品，样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备：1. 抗凝全血(本实验以300 μl人的抗凝全血为例 )2. 移液器及配套无菌枪头（2.5 μl ， 200 μl ，1ml），1.5 ml离心管3. 无水乙醇，70%乙醇，干净的吸水纸4. 涡旋振荡器，金属浴/水浴，台式离心机备注：本实验以人血为例，如提取哺乳动物全血可以用此流程，如果禽类、鸟类
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