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- KALANG
- 中国大陆
- KL058
- 2025年07月16日
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2～8℃
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长期
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大量
- 供应商：
康朗生物
- 规格：
20次/50次
总RNA提取试剂盒(TRIzol法)
规格：20次/50次编号：KL058
产品介绍：
TRIpure试剂是直接从细胞或组织中提取总RNA的试剂。 它在破碎和溶解细胞时能保持RNA的完整性。加入后离心， 样品分成水样层和有机层。RNA存在于水样层中。 收集上面的水样层后， RNA可以通过异丙醇沉淀来还原。 在除去水样层后， 样品中的DNA和蛋白也能相继以沉淀的方式还原。乙醇沉淀能析出中间层的DNA， 在有机层中加入异丙醇能沉淀出蛋白。共纯化DNA对于样品间标准化RNA的产量十分有用。
无论是人、 动物、 植物还是细菌组织， 该方法对少量的组织(50-100 mg)和细胞(5×106)以及大量的组织(≥1g)和细胞(>107)均有较好的分离效果。 TRIpure试剂操作上的简单性允许同时处理多个的样品。所有的操作可以在一小时内完成。
TRIpure抽提的总RNA能够避免DNA和蛋白的污染。故而能够作RNA印迹分析、 斑点杂交、 poly(A)+选择、 体外翻译、 RNA酶保护分析和分子克隆。如果是用于PCR， 当两条引物位于单一外显子内时， 建议用扩增级的DNase I来处理抽提的总RNA。
TRIpure试剂能促进不同种属不同分子量大小的多种RNA的析出。 例如， 从大鼠肝脏抽提的RNA琼脂糖凝胶电泳并用溴化乙啶染色， 可见许多介于7 kb和15 kb之间不连续的高分子量条带(mRNA和hnRNA成分)， 两条优势核糖体-5 kb(28S)和-2 kb(18S)， 低分子量RNA介于0.1和0.3 kb之间(tRNA， 5S)。当抽提的RNA用TE稀释时其A260/A280比值≥1.8。
适用范围：
适用于各种动植物组织/细胞总RNA，DNA， 蛋白的快速抽提。
产品储存：
TRIpur e在室温下能稳定保存12个月， 4°C最佳。
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文献和实验量和 Trizol 的加入量一定要按步骤（ 1 ）的比例，不能随意增加样品量或减少 Trizol 量，否则会使内源性 RNase 的抑制不完全，导致 RNA 降解 2 ．实验过程必须严格防止 RNsae 的污染。 （四）总 RNA 定量 RNA 定量方法与 DNA 定量相似。 RNA 在 260nm 波长处有最大的吸收峰。因此，可以用 260nm 波长分光测定 RNA 浓度， OD 值为 1 相当于大约 40 μ g/ml 的单链 RNA 。如用 1cm 光径，用 ddH 2 O
在收集到生物材料之后，最好能即刻进行RNA 制备工作。若需暂时储存，则应以液氮将生物材料急速冷冻后，储存于-80℃冷冻柜。在制备RNA 时，将储存于冷冻柜的材料取出，立即以加入液氮研磨的方式打破细胞，不可以先行解冻，以避免RNase 的作用。 1. 提取组织RNA 时，每50～100mg 组织用1ml Trizol 试剂对组织进行裂解；提取细胞RNA 时，先离心沉淀细胞，每5-10 �106 个细胞加1ml Trizol 后，反复用枪吹打或剧烈振荡以裂解细胞； 2. 将上述组织或细胞
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