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- KALANG
- 中国大陆
- KL527
- 2025年07月15日
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4℃
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一年
- 英文名：
Total RNA Extraction Reagent(Trizol Method)
- 库存：
大量
- 供应商：
康朗生物
- 规格：
100ml
总RNA抽提试剂(Trizol法)
编号：KL527英文名：Total RNA Extraction Reagent(Trizol Method)
规格：100ml
本试剂是一种用于动植物细胞或组织及细菌总RNA抽提的试剂。本产品采用和Invitrogen公司的TRIzol完全相似的原理和方法，抽提的方法和步骤完全相同。
本试剂的颜色和TRIzol相同，加入氯*(代"仿")后上层呈无色，下层呈紫红色，便于吸取上层水相。
本试剂可以抽提长达15 kb的RNA，也可以抽提microRNA等小RNA。抽提小RNA时宜-70℃沉淀过夜。抽提所得RNA无DNA和蛋白污染。一般所得RNA溶于DEPC水后的A260/280值为1.8-2.0。裂解细胞或和组织共匀浆时，可以保持样品中RNA的完整性，即可以有效抑制RNA的降解。
每一百万细胞用Trizol抽提可得5-15μg RNA；每毫克组织用Trizol抽提可得1-10μg RNA。产量因细胞和组织不同而异。每100ml本试剂可以抽提100个六孔板中的样品或100个50-80mg的组织样品。抽提两个样品约需一小时。抽提所得RNA可直接用于Northern，点杂交，纯化mRNA，体外翻译，RNase protection assay，cDNA克隆，以及RT-PCR；也可以用于基因表达芯片分析、高通量测序(deep sequencing)等对RNA质量要求较高的情况。
注意事项：
1. 需自备氯*(代"仿")，异丙醇，DEPC，75%乙醇(DEPC水配制)，和DEPC水。DEPC(ST036)，DEPC水(YT528)可向百奥莱博订购。
2. 所有离心管，枪头及相关溶液都必须无RNA酶污染。耐高温器物可150℃烘烤4小时以去除RNA酶，其它器物去除RNA酶可考虑用0.01%的DEPC水浸泡过夜，然后灭菌，烘干。溶液需用DEPC水配制。加0.01%(体积比) diethylpyrocarbonate(DEPC)至重蒸水或Milli-Q级水中，处理过夜，灭菌即成DEPC水。
3. 使用冻存的细胞或组织抽提总RNA的效果通常比新鲜的细胞或组织差一些。因为在细胞或组织冻融过程中一些细胞或组织内的RNase会被释放出来并剪切样品。如果不能及时抽提RNA，推荐先加入适量Trizol，并裂解样品后冻存。
4. 必须戴一次性手套操作，且尽量不要对着RNA样品呼气或说话，以防RNA酶污染。建议戴一次性口罩操作。
5. Trizol含有毒物质苯酚，避免接触皮肤或吸入。为防止溅入眼睛，请戴防护眼镜或使用透明保护屏。如皮肤接触Trizol，请立即用大量去垢剂和水冲洗，如仍有不适，请听取医生意见。
6. Trizol抽提总RNA的同时，理论上也可抽提蛋白和DNA，但未经测试。有兴趣者可按Invitrogen公司的TRIzol的操作步骤进行操作。
储存条件：4℃，有效期一年。
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文献和实验RNA 的 trizol，好像贵一些。 2. 关于配套试剂： Trizol 法提取 RNA 是要用到氯仿、异丙醇和乙醇的。氯仿现在是违禁品，不大好买（我们学校试剂科现在不卖），所以买的时候要让试剂上给送，一般他们都能免费给送。氯仿遇光易分解，试剂商给你的时候应该是遮光的。异丙醇虽然没有特殊说明，但我查的据说也是最好避光保存，不过这种试剂都是棕色瓶子，能遮蔽大部分的光线了。 3. 关于实验时的防护： RNA 很容易降解，所以实验时一般都要求口罩帽子的，避免组织的污染。不过以我的经验
RNA抽提指南(TRIZOL法) 注意事项： * 全程佩戴一次性手套。皮肤经常带有细菌和霉菌，可能污染RNA的抽提并成为RNA酶的来源。培养良好的微生物实验操作习惯预防微生物污染。 * 使用灭菌的，一次性的塑料器皿和自动吸管抽提RNA，避免使用公共仪器所导致的RNA酶交叉污染。例如，使用RNA探针的实验室可能用RNA酶A 或T1来降低滤纸上的背景，因而某些非一次性的物品（如自动吸管）可能富含RNA酶。 * 在TRIZOL 中，RNA 是隔离在RNA 酶污染之外的。而对样品
自己整理的protocol,希望对大家有所帮助！ Preparations: 1. 高压2遍的物品及试剂：Ep管[大、中、小] 移液枪头[大、中、小] 0.1%DEPC[sigma]水—v/v, 室温静置过夜-高压2遍（大Ep管分装 后冻与-20℃） 2. 试剂：Trizol[invitrogen]（4度） 100%无水乙醇（生产日期近，越久的挥发越多；及时盖盖） 氯仿（三氯甲烷CH3Cl3） 异丙醇 3. 其它：手套【需要勤换-防止RNA酶降解RNA】；口罩；冰盒
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