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ExCell Bio
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现货供应
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500个/包,2包/盒
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文献和实验。 4.建议使用RNA 专用分析仪器设备,如电泳槽、微量加样器等。 六、实验准备 从所有样品中提取总RNA 和基因组DNA 都需做如下准备: 1.RNase-free 的Tip 头、1.5 ml 离心管、带4~6 号针头的1 ml 注射器。 2.4℃预冷Buffer R-A、Buffer R-B、Buffer R-C 和Buffer R-D。 3.65℃预热Buffer G-A、Eluent 或去离子水。 4.检查Buffer R-E 是否出现沉淀,若有沉淀请于37℃温育至沉淀完全溶解
、在立体显微镜下,可以看到明显的 3D 结构。使用 200μl 移液器吸头从每个孔中收集球状体,并将大约 50 个球状体集中到 5ml 微量离心管中。 中肠和后肠球状体生长成人肠类器官 11、收集球状体后,将微量离心管垂直放置在管架上 10min,此时球体通过重力沉降到离心管底部。吸出上清,控制总体积在 25μl 左右。 12、将冻存的 Matrigel 在 4℃ 下过夜解冻,添加 B-27 补充剂(终浓度 1×)、R-spondin1 (终浓度 500ng/ml),Noggin (终浓度100
细胞。刮去每块板上的细胞到 1 ml 冰冷的 EBC 裂解缓冲液中。 将每毫升细胞悬液转移到微量离心管中,在微量离心机上 4 ℃ 以最大速度离心 15 min。 收集上清(约 30 ml)并加入 30 μg 的适当抗体,4 ℃ 摇动免疫沉淀物 1 h。 加入 0.9 ml 的蛋白质 A-Sepharose 悬液,4 ℃ 摇动免疫沉淀物 30 min。 用含 900 mmol/L NaCl 的 NETN 洗蛋白 A-Sepharose 混合物,再重复洗 5 次。最后,用 NETN 洗
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