大鼠瘦素检测试剂盒

大鼠瘦素（LEP）ELISA检测试剂盒 - 精准可靠的瘦素检测工具

产品概览

• 产品名称： 大鼠瘦素（LEP）ELISA检测试剂盒
• 货号： 日本IBL 27295
• 品牌： 日本IBL
• 规格： 96T
• 应用： 血清、EDTA-血浆和细胞上清中的瘦素定量检测

产品背景
1950年，科学家发现隐性肥胖基因突变导致肥胖，并与二型糖尿病综合征的病态肥胖类似。1994年，洛克菲勒大学Freidman团队发现肥胖基因编码形成瘦素，这是一种由肥胖基因产生的16KDa分泌型蛋白。瘦素由脂肪组织产生并释放至血液中，其水平与脂肪累积成正比。瘦素不仅作为脂肪调节器，还能通过中枢神经系统抑制骨形成，并用于标记和控制青春期的开始。

 

 实验原理
该试剂盒采用夹心法ELISA，使用两种高特异性的抗体。TMB作为显色剂，最终溶液的颜色强度与样品中瘦素的量成正比。

 

 检测范围

• 56.25~3600皮克/毫升

试剂盒组成

• 微孔板： 96T，包被有抗大鼠瘦素兔子IgG抗体，亲和纯化
• 标记抗体浓缩： 30X，0.4ml，HRP标记的抗大鼠瘦素兔IgG Fab片段
• 标准品： 0.5ml，2支，大鼠瘦素
• EIA缓冲液： 30ml，1%的BSA，含0.05%的吐温20的PBS
• 标记抗体稀释液： 12ml，1%的BSA，含0.05%的吐温20的PBS
• 着色剂： TMB，15ml
• 终止液： 1N硫酸，12ml
• 洗涤缓冲浓缩液： 40X，50ml，0.005%吐温20的磷酸缓冲液

准备步骤

1. 洗涤缓冲液制备： 将50ml洗涤浓缩液与1950ml去离子水混匀。配制的洗涤液应保存于冰箱内，并于2周内用完。
2. 标记抗体的制备： 用标记抗体稀释液将标记抗体稀释30倍。例如，如果测一条板（8孔），需要标记抗体800ul（30ul的标记抗体+870ul的标记抗体稀释液，混匀，每孔加100ul）。此步骤在实验开始前完成，剩余的标记抗体浓缩应密封保存于4℃。
3. 标准品的制备： 吸取0.5ml去离子水至标准品瓶内，混匀，得到7200pg/ml的大鼠瘦素标准品。
4. 标准品的稀释： 准备8个试管，每管加入230ul的EIA缓冲液，用于标准品的稀释。

试验所需材料但试剂盒未提供

• 酶标仪（450nm）
• 带刻度的量筒与烧杯
• 孵箱（37°C±1°C）
• 吸水纸
• 稀释试管
• 微量移液器和取样吸头
• 去离子水
• 坐标纸（log/log）
• 用于稀释标准品的试管
• 洗涤瓶

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