组织脱蜡透明剂

FFPE 样本前处理过程及注意事项

全部占满，包埋盒的四周与上下都应该留有余地，利于组织固定和脱水。 脱水 脱水指的是利用脱水剂如不同浓度的乙醇将组织内的水分逐步置换出来，需要注意彻底脱水，避免残留水分导致核酸降解。该步骤通常由脱水机完成，需要注意及时更换脱水机中的液体，使用新鲜的、高质量、不经水稀释的试剂，避免水分残留。   透明和浸蜡 当组织内的水分被脱水剂置换出，透明剂（通常是二甲苯）进入组织，置换出脱水剂，因透明剂的折光系数接近蛋白的折光系数，因此会使组织变得透亮，该过程称之为透明。组织透明后在熔化的石蜡内浸泡的过程称为浸蜡

石蜡切片（paraffin section）

　　石蜡切片制作基本技术 石蜡切片法包括取材、固定、洗涤和脱水、透明、浸蜡、包埋、切片与粘片、脱蜡、染色、脱水、透明、封片等步骤。一般的组织从取材固定到封片制成玻片标本需要数日，但标本可以长期保存使用，为永久性显微玻片标本。 　　1.取材 应根据要求选取材料来源及部位。例如植物细胞有丝分裂多选取洋葱根尖，细胞分裂快又便于切取；猪的肝小叶边界清晰明确；耳蜗以豚鼠的内耳易于定位和剥离。材料必须新鲜，搁置时间过久则产生蛋白质分解变性，导致细胞自溶及细菌

进阶：6 年免疫组化经验总结

也较陈旧，则脱蜡时间需要延长，10-20 min 或更长。   3、当天切的切片，烧烤 2 小时后进行染色，切片带有温度进行脱蜡这将可加速脱蜡的过程，如果预先切好烤好的切片，在染色前，还必须对切片进行加温 10-20 min，然后再行脱蜡，这样脱蜡速度加快，效果会更好。   总之，操作时应根据不同的季节，不同的室温，不同的试剂来决定，脱蜡的时间，原则上是要彻底、干净、完全地脱去切片上的蜡。   十二、如何最大限度地降低组织非特异性染色？ 1、缩短一抗/二抗孵育时间、稀释抗体来控制。这是最重要的一条