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—20℃,12个月
- 保质期:
2年
- 库存:
20
- 供应商:
康朗生物
- 英文名:
pcDNA3.2/V5-DEST
- 规格:
5ug
pcDNA3.2/V5-DEST载体
基本信息| 质粒类型: | 哺乳动物表达载体 |
|---|---|
| 启动子: | CMV |
| 克隆方法: | Gateway |
| 载体大小: | 7711 bp (查看载体序列) |
| 5' 测序引物及序列: | T7 Fwd: 5'd[TAATACGACTCACTATAGGG]3' |
| 载体标签: | V5 Epitope Tag |
| 载体抗性: | Ampicillin (氨苄青霉素) |
| 筛选标记: | Neomycin (新霉素) |
订购信息
| 产品编号 | 产品名称 | 规格 | 价格 |
|---|---|---|---|
| KL1016 | pcDNA3.2/V5-DEST | 5ug质粒 |
询价 |
质粒图谱
载体描述
pcDNA3.2/V5-DEST空载上,CMV启动子后有ccdB表达框,所以此载体只能在DB3.1等专用的大肠杆菌中才能复制扩增,使用此载体时,请注意配套相应的DB3.1感受态。当外源基因成功插入,ccdB表达框将被置换掉,此时,重组质粒可以在DH5α等常规大肠杆菌中复制扩增。GACGGATCGGGAGATCTCCCGATCCCCTATGGTCGACTCTCAGTACAATCTGCTCTGATGCCGCATAGTT
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文献和实验相关专题引物设计载体 名称上游引物 ( 5'primer )下游引物( 3'primer )P3*FLAG-CMVCMV-30(825-854)CMV-24(1129-1152)pAc5.1/V5-His(_A,_B,_C)pAc5-5BGH revpAcG2TpGEX-5not availablepACTT7EEVT3/EBVrevpACT2GAL4 ADforpGAL4-ADrvpACT2p17110p12584pACYC184(BamHI-site
2)。 图2 使用BLOCK-iT™ Complete Dicer RNAi Kit得到>80%的靶定基因阻断 经Dicer酶切的,来源于β-半乳糖苷酶或者荧光素酶的dsRNA产生siRNA(d-siRNA)库,用来确定d-siRNA特异阻断基因活性的效果。GripTite™ 293 MSR 细胞共转染pcDNA™1.2/V5-GW/lacZ阳性对照质粒和pcDNA™5/FRT/luc,分别独自表达β-gal或者荧光素酶报告子,或者50ng luc 或者lacZ d-siRNA。对于每一种报告子
基因编辑再次升级!领域大牛刘如谦 Cell 发文开发新工具,可安全高效进行体内基因编辑
4 BE-eVLPs 支持有效、高效的基因编辑,并且显示出最小的脱靶编辑效率和 DNA 整合风险。 图片来源:Cell v4 BE-eVLPs 有效地编辑人类原代细胞和小鼠细胞 为了进一步探索 v4 BE-eVLPs 的效用,他们评估了其在体外靶向和编辑多种原代人类或小鼠细胞的能力。在转导含有纯合子 COL7A1(R185X)突变的原代人类成纤维细胞中,他们观察到高于 95% 的修复效率。这种高效率在小鼠模型的原代成纤维细胞中也得到了重现。 这些结果验证了 v4 BE-eVLPs 的活性并不局限于细胞
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