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信裕生物
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20次
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文献和实验1、分别设立两个反应,用适当的限制性内切核酸酶消化1-10μg质粒DNA和外源DNA片段,使它们能产生平末端。2、苯酚:氯仿抽提与乙醇沉淀法纯化出已被消化的载体和外源DNA片段。3、分别用TE(pH 8.0)重新溶解纯化出的两种DNA沉淀,使终浓度为100 ng/ml。假设1 bp相当于660Da,计算DNA的终浓度(pmol/ml)。4、将载体DNA去磷酸化。5、按下表将适量的DNA转移至无菌的0.5ml离心管:管号DNAA和E载体1 [60fmol (~100ng)]B外源插入
在质粒载体中进行平末端片段的克隆 1. 分别设立两个反应,用适当的限制性内切核酸酶消化 1~10 μ g 质粒 DNA 和外源 DNA 片段,使它们能产生平末端。 2. 苯酚:氯仿抽提与乙醇沉淀法纯化出已被消化的载体和外源 DNA 片段。 3. 分别用 TE ( pH 8.0 )重新溶解纯化出的两种 DNA 沉淀,使终浓度为 100 ng/ml 。 假设 1 bp 相当于 660 Da ,计算 DNA 的终浓度( pmol/ml
1.分别设立两个反应,用适当的限制性内切核酸酶消化1~10μg质粒DNA和外源DNA片段,使它们能产生平末端。2.苯酚:氯仿抽提与乙醇沉淀法纯化出已被消化的载体和外源DNA片段。3.分别用TE(pH 8.0)重新溶解纯化出的两种DNA沉淀,使终浓度为100 ng/ml。 假设1 bp相当于660 Da,计算DNA的终浓度(pmol/ml)。4.将载体DNA去磷酸化。5.按下表将适量的DNA转移至无菌的0.5 ml离心管: 管号DNAA和E载体
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