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Origami 2(DE3)pLacI

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      Origami 2(DE3)pLacI

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    • 供应商

      信裕生物

    • 规格

      10×100μl/50×100μl

    Origami 2(DE3)pLacI感受态细胞

    感受态细胞基本信息

    感受态细胞名称: Origami2(DE3), Origami 2 DE3, Origami 2(DE3)
    菌株类型: E.coli
    产品目录号: 71345-3, 71345-4
    培养基: LB培养基
    生长条件: 37 ℃, 有氧
    基因型: Origami2(DE3)pLacI感受态细胞基因型
    抗性: 链霉素,四环素,氯霉素
    质粒转化条件: 42 ℃热激
    应用: 蛋白表达, 含二硫键蛋白表达
    诱导方法: IPTG
    菌株特点:
    Origami 2系列感受态细胞是K-12细胞的衍生而来,在thioredoxin reductase (trxB)和glutathione reductase (gor)基因上同时含有突变,这使得该菌株能够更加高效的在细胞质内生成二硫键,有助于含二硫键蛋白的活性蛋白形成。

    与Origami系列感受态相比,Origami 2系列感受态细胞是卡那敏感的,这使得该菌株能够适用于大多数的Novagen公司的蛋白表达质粒。Gor基因突变使得该菌株和原来的Origami(DE3)菌株一样具有四环素抗性。

    DE3是溶源性的 λDE3, 所以在lacUV5启动子下携带有T7 RNA聚合酶的染色体拷贝。该菌株适用于pET系列载体,及其他T7启动子系列载体。

    pLacI基因型表明该菌株含有pACYC184质粒,该质粒含有Lac抑制子基因。

    亮氨酸生长缺陷型宿主菌。

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      产生少量溶菌酶,而 pLysE 宿主菌产生更大量酶。这些菌株用于在诱导前抑制 T7 RNA 聚合酶的基础表达,这样可以稳定编码影响细胞生长和活力的目标蛋白的 pET 重组体。带有 pLacI 的宿主菌产生额外的抑制 pETBlue 和 pTriEx 载体基础表达的 lac 阻遏蛋白。 λ DE3 溶原化试剂盒用于制备其它遗传背景的新表达宿主菌。 AD494 菌株为硫氧还蛋白还原酶 ( trxB ) 突变菌株,能够在胞浆内形成二硫键,提供了生产正确折迭的活性蛋白的潜力。 TrxB 突变可用

    • 很多新手在问做原核表达需要考虑的载体和菌株的选择,现系统地解答一下,供新手借鉴。

      方向且符合每个载体的翻译要求, pETBlue 载体中目标基因可以高水平表达。用两种方法进行蛋白表达:用 l CE6 ( l pL 启动子控制 T7 RNA 聚合酶表达的噬菌体)感染,或转化重组 pETBlue 质粒到宿主菌 Tuner TM (DE3)pLacIOrigami TM (DE3)pLacI 中并用 IPTG 诱导。这些宿主菌染色体上带有一拷贝 lacUV5 控制的 T7 RNA 聚合酶基因,并通过相容的 pLacI 质粒提供足够 lac 阻遏蛋白,以确保低水平的未

    • 【专题讨论】原核表达秘笈之宿主菌株的选择!(接原原核表达研究者关心的10个问题贴)

      的生产任务”——因为很难亲眼观察微观世界中表达是如何进行的,当出现问题时,我们需要经验判断问题所在。宿主细胞对原核表达可能会产生哪些影响呢? 知其然还要知其所以然。比如,菌株内源的蛋白酶过多,可能会造成外源表达产物的不稳定,所以一些蛋白酶缺陷型菌株往往成为理想的起始表达菌株。堪称经典的BL21系列就是lon和ompT蛋白酶缺陷型,也是我们非常熟悉的表达菌株。大名鼎鼎的BL21(DE3)融源菌则是添加T7聚合酶基因,为T7表达系统而设计。 真核细胞偏爱的密码子和原核系统有不同,因此,在用原核系统

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