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文献和实验基因编辑再次升级！领域大牛刘如谦 Cell 发文开发新工具，可安全高效进行体内基因编辑
293T 细胞。 图片来源：Cell VLP 的持续改善以优化其递送性能 虽然上述实验证明了 v1 BE-VLPs 可以在体外细胞系中实现高效递送和精准编辑，但这些常用的测试细胞系尤其容易被基因编辑，并且缺乏治疗相关性。考虑到只有在病毒颗粒成熟后才会发挥切割功能并释放出 ABE8e-RNP。所以他们认为切割效率可能会成为 BE-VLP 编辑的瓶颈。 在第二代工程编辑的 BE-eVLPs（v2 BE-eVLPs）中，他们对连接肽体系进行了优化。研究人员筛选了 4 个已知被 MMLV 蛋白酶以不同效率切割
验对保真度要求较高，在选择 DNA 聚合酶的时候就需要使用高保真酶，如 Pfu、KOD、Primerstar、Phanta 等。前三者都属于第一代高保真酶，已在市场中广泛使用。诺唯赞科研团队的大力改造生产的 Phanta 系列的高保真酶，保真度达到了 Taq 酶的 50 倍，扩增性能、扩增长度、产量、模板适应性都显著提升。Phanta Max 保真度是 Taq 酶的 53 倍，Pfu 的 6 倍，对于质粒等简单模板有效扩增长度可达 40kb，cDNA 有效扩增长度可达 10kb，基因组有效扩增
lab 后来推出 lentivirus 版本的 Cas9 质粒系统 (lentiCRISPR v2)。这个系统设计起来和 pX330 一样，但克隆构建使用的酶切位点不同。 文章来源：文章由冰糖授权转载 图片来源：网络
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