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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
负20度
- 保质期:
2年
- 英文名:
pcDNA3-FLAG-MAGI1c
- 库存:
100
- 供应商:
kelei-bio
- 规格:
20μl
详细请登录网站查询 www.kelei-biology.com.或发邮件至1722105945@qq.com,(QQ:1722105945)我们会第一时间给您回复。
柯雷生物拥有数万种质粒,菌种,基因,细胞株,试剂盒等科研资源,还提供基因合成,质粒改造,载体构建和蛋白表达等精品实验服务
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文献和实验-1,pBADHis, pBADHislacZ,pLLP ompA, pINIIIompA, pMBP-P ,pMBP-C 共表达质粒:pCDFduet-1 以及pCDNA3.1,pEGFP-N2等 大肠杆菌Rosetta(DE3),Rasettagame(DE3),Top10F', BL21(DE3)plySS 等 酵母表达质粒: pPICZαA, pGAPZαA, 酵母细胞 KM71, X33 yingzi
通过加入基因组 DNA 模板以及设计好的引物进行目的基因的扩增,得到 PCR 产物后进行琼脂糖凝胶电泳验证条带大小,然后通过胶回收,获得纯化目的片段产物。由于加入保护碱基,回收产物需要进行限制性内切酶切从而暴露黏性末端。2. 线性化质粒:将原始的质粒载体,比如 pcDNA3.1 质粒,选择合适的酶切位点,比如 NheI/KpnI 进行酶切,获得线性化的质粒。酶切体系一般选择 50ul,试剂加好之后 37°C 孵育 6~8 小时,或适当延长时间,保证质粒酶切完全。每隔一段时间振荡一下并离心以防液滴蒸发
通过加入基因组 DNA 模板以及设计好的引物进行目的基因的扩增,得到 PCR 产物后进行琼脂糖凝胶电泳验证条带大小,然后通过胶回收,获得纯化目的片段产物。由于加入保护碱基,回收产物需要进行限制性内切酶切从而暴露黏性末端。2. 线性化质粒:将原始的质粒载体,比如 pcDNA3.1 质粒,选择合适的酶切位点,比如 NheI/KpnI 进行酶切,获得线性化的质粒。酶切体系一般选择 50ul,试剂加好之后 37°C 孵育 6~8 小时,或适当延长时间,保证质粒酶切完全。每隔一段时间振荡一下并离心以防液滴蒸发
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