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- 2025年07月08日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
负20度
- 保质期：
2年
- 英文名：
pCDH-CMV-MCS-EF1-copGFP
- 库存：
100
- 供应商：
kelei-bio
- 规格：
20μl
启动子: EF-1α core ,CMV
复制子: pUC ori，SV40 ori
终止子: SV40 poly(A) signal
质粒分类: 病毒系列，慢病毒克隆载体
质粒大小: 8189bp
原核抗性: Amp 筛选标记: Puro
克隆菌株: Stbl3
培养条件: 37℃，有氧 LB
表达宿主: 哺乳细胞
诱导方式: 无须诱导，瞬时表达
5'测序引物: CMV-F：CGCAAATGGGCGGTAGGCGTG
3'测序引物: 根据序列设计引物
质粒简介
PCDH-CMV-MCS-EF1-CopGFP-T2A-Puro polyclonal site (MCS) - in MCS is located in the CMV promoter downstream of interest gene cloning.To improve stability and CMV driven transcription translation. SV40 multi - poly adenosine acidification signal to enable the efficiency of transcription and transcription termination. The hybrid / RSV 5ltr promoter provides a high level of viral transcript expression in 293 cells of this full-length producer.
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- 内容
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文献和实验naj2007 请教一下各位老师，在构建过表达载体的时候，VEGF和GFP是不是不可以做成融合蛋白，但是如果用不同的启动子的话，很容易丢失荧光，有没有什么解决方法。 zhujoker 可以做成融合蛋白的，即使是使用不同的启动子的话荧光也不那么容易丢失的，大不了你将荧光的启动子换成强的如CMV，EF1a之类。 kinguangjun 或者你可以用CMV-VEGF-IRES-GFP来做
【求助】【求助】将病毒载体感染细胞只有部分基因表达为什么，什么方法可以探究基因未表达的原因
，总有一个基因没有表达？请大家出出主意是什么问题？哪些实验方法可以帮助发现问题。 我想了几下原因： 1。各个基因表达的不均衡性，可能是marker基因表达太弱。不能被检测 2.可能是不同基因的启动子不一样，我的是CMV和EF1，细胞对启动子不敏感 3.外源基因的启动子被沉默失效 4.存在基因剪切错误的问题，但是我的基因链接是用T2A，可以剪切的。 只能想到这些问题。 老板让分析一下。但我对这方面了解不是很多。我准备用PCR
该载体在大肠杆菌中的复制。 U6启动子是确保目的shRNA转录，个人觉得转染的shRNA表达载体应该具有真核复制起点吧？！ 网上搜到一种RNAi载体pGO包含的序列：pUC复制起点pUCori、fl复制起点flori、细菌启动子P、卡那霉素基因Kan、HSV-TKPolyA、U6启动子U6promoter 和多克隆位点MCS，其特征在于还含有用于表达绿色荧光蛋白基因的转录元件，包括CMV启动子CMVpromoter、增强绿色荧光蛋白基因EGFP和 SV40PolyA
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