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pECFP-N1质粒

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    • 保质期

      2年

    • 英文名

      pECFP-N1

    • 库存

      100

    • 供应商

      kelei-bio

    • 规格

      20μl

    基本信息
    启动子: CMV
    复制子: pUC ori,f1 ori
    终止子: SV40 poly(A) signal
    质粒分类: 哺乳细胞,荧光蛋白报告载体
    质粒大小: 4733bp
    原核抗性: Kan 筛选标记: Neo
    克隆菌株: DH5α
    培养条件: 37℃,有氧 LB
    表达宿主: 哺乳细胞
    诱导方式: 无须诱导,瞬时表达
    5'测序引物: CMV-F:CGCAAATGGGCGGTAGGCGTG
    3'测序引物: Sv40-polyA-R:GAAATTTGTGATGCTATTGC
    质粒简介
    pECFP-N1 encodes an enhanced cyan fluorescent variant of the Aequorea victoria green fluores-cent protein gene (GFP). The ECFP gene contains six amino acid substitutions. The Tyr-66 to Trpsubstitution gives ECFP fluorescence excitation (major peak at 433 nm and a minor peak at 453 nm)and emission (major peak at 475 nm and a minor peak at 501 nm) similar to other cyan emissionvariants. The other five substitutions (Phe-64 to Leu; Ser-65 to Thr; Asn-146 to Ile; Met-153to Thr; and Val-163 to Ala) enhance the brightness and solubility of the protein, primarily due toimproved protein folding properties and efficiency of chromophore formation. In addition to the chromophore mutations, ECFP contains >190 silent mutations that create an open reading framecomprised almost entirely of preferred human codons. Furthermore, upstream sequences flanking ECFP have been converted to a Kozak consensus translation initiation site. These changes increasethe translational efficiency of the ECFP mRNA and consequently the expression of ECFP in mammalian and plant cells.

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