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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
负20度
- 保质期:
2年
- 英文名:
pET-44a 非空(BamHI-XhoI)
- 库存:
100
- 供应商:
kelei-bio
- 规格:
20μl
启动子: T7/lac
复制子: ColE1 ori,F1 ori
终止子: T7 terminator
质粒分类: 大肠杆菌载体;PET系列表达质粒
质粒大小: 7311bp
质粒标签: C-HSV, N-6×His, C-6×His, N-Thrombin, N-Nus, N-EK
原核抗性: 氨苄青霉素Amp
克隆菌株: DH5α
培养条件: 37℃,有氧,LB
表达宿主: BL21(DE3)
诱导方式: IPTG或乳糖及其类似物
5'测序引物: T7:TAATACGACTCACTATAGGG
3'测序引物: T7-ter:TGCTAGTTATTGCTCAGCGG
质粒简介
pET44系列载体是设计用来克隆和高水平表达含有495个氨基酸的Nus标签的蛋白表达载体。与pET-43.1系列载体相比,pET44系列载体额外编码一个N端的His蛋白纯化标签。 pET42a载体的单一的多克隆位点见上面的环状质粒图谱。注意:载体序列是以pBR322质粒的编码规矩进行编码的,所以T7蛋白表达区在质粒图谱上面 是反向的。T7 RNA聚合酶启动的克隆和表达区域在质粒图谱中也被标注了出来。质粒的F1复制子是被定向的,所以在T7噬菌体聚合酶的作用下,包含有蛋白编码序列的病毒 粒子能够产生,并启动蛋白表达,同时蛋白表达将被T7终止子序列的作用下终止蛋白翻译。对pET44a载体的单链测序可以使用COLIDOWN primer. 把表达的基因插入到载体的PshAI或者SmaI限制性内切酶位点时,可以通过EK蛋白酶或者Thrombin蛋白酶将融合表达的Nus标签完全切除。
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文献和实验DNA并用指示限制酶消化。通过限制酶消化鉴定插入物的存在。M:DNA标记,1:用BamHI / SalI消化后的重组pET-32α(+)载体经验有时通过PCR仍然难以获得DNA产物,因为引物被定义为具有起始密码子和终止密码子的有限区域,因此人工合成所需的基因是获得DNA片段的替代选择。根据我们的经验,表达载体很大或具有低拷贝数,因此更有效的方法是首先将DNA片段克隆到非表达载体中,然后将其亚克隆到表达载体中。确保在感受态细胞中设置没有载体的阴性对照和在转化期间在大肠杆菌细胞中单独使用空载体的阳性
, either alone or in combination with chemo- or radiotherapy at the more advanced stages. However, many patients present with metastatic disease at the time of diagnosis. Both computed tomography (CT) and positron emission tomography (PET) using fluorodeoxyglucose (FDG) play
CD44/CD44R 分子 CD44 常用单克隆抗体或代号: GRHL1,Hermes,F10- 44- 2(Pgp- 1H- CAM,ECM- RⅢ) 主要表达细胞: Leu,上皮,Fb,RBC[AS] 分子质量(kDa)和结构: gp80- 95 功 能: 粘附ECM,T细胞活化,淋巴细胞归位受体,归位到HEV CD44R 常用单克隆抗体或代号: FM11,24
技术资料暂无技术资料 索取技术资料





