pET-44a 非空（BamHI-XhoI）质粒

基本信息
启动子: T7/lac
复制子: ColE1 ori，F1 ori
终止子: T7 terminator
质粒分类: 大肠杆菌载体；PET系列表达质粒
质粒大小: 7311bp
质粒标签: C-HSV, N-6×His, C-6×His, N-Thrombin, N-Nus, N-EK
原核抗性: 氨苄青霉素Amp
克隆菌株: DH5α
培养条件: 37℃，有氧，LB
表达宿主: BL21(DE3)
诱导方式: IPTG或乳糖及其类似物
5'测序引物: T7:TAATACGACTCACTATAGGG
3'测序引物: T7-ter:TGCTAGTTATTGCTCAGCGG
质粒简介
pET44系列载体是设计用来克隆和高水平表达含有495个氨基酸的Nus标签的蛋白表达载体。与pET-43.1系列载体相比，pET44系列载体额外编码一个N端的His蛋白纯化标签。 pET42a载体的单一的多克隆位点见上面的环状质粒图谱。注意：载体序列是以pBR322质粒的编码规矩进行编码的，所以T7蛋白表达区在质粒图谱上面 是反向的。T7 RNA聚合酶启动的克隆和表达区域在质粒图谱中也被标注了出来。质粒的F1复制子是被定向的，所以在T7噬菌体聚合酶的作用下，包含有蛋白编码序列的病毒 粒子能够产生，并启动蛋白表达，同时蛋白表达将被T7终止子序列的作用下终止蛋白翻译。对pET44a载体的单链测序可以使用COLIDOWN primer. 把表达的基因插入到载体的PshAI或者SmaI限制性内切酶位点时，可以通过EK蛋白酶或者Thrombin蛋白酶将融合表达的Nus标签完全切除。