GV3101根癌农杆菌

Agrobacterium growth and transformation (农杆菌培养及转化)

  Growth and storage of Agrobacterium tumefaciens(农杆菌培养及转化) Strain GV3101: resistant to gentamycin and rifampicin so add 25-50 ug/ml Gentamycin, 10 ug/ ml rifampicin on plates or in liquid media for selection. GV3101

利用农杆菌侵染烟草进行体内瞬时表达的方法

1. 50 ml 离心管 2. 光谱仪 3. 紫外灯 4. 荧光显微镜 四、步骤 1. 挑取单克隆于5 ml LB液体培养中，28~30°C震荡培养。通常，LB中加入100 ug/ml 庆大霉素（农杆菌株GV3101携带抗性），50 ug/ml 大观霉素（载体携带）。 2. 将1 ml 过夜培养的农杆菌转接到25 ml LB液体培养基中（加有与1相同的抗生素，另外加入高压灭菌的乙酰丁香酮）。 3. 检测过夜培养的菌液OD600的值。 4. 5000 g，15

植物转基因技术

的转化方法 1 根癌农杆菌介导转化法 根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)是普遍存在于土壤中的一种革兰氏阴性细菌。它能在自然条件下感染大多数双子叶植物的受伤部位，并诱导产生冠瘿瘤(crown gall tumor)。根癌农杆菌细胞中含有Ti 质粒(tumor-inducing plasmid，瘤诱导质粒)。在Ti 质粒上有一段T-DNA(T-DNA region)，即转移-DNA(transfer-DNA)，又称为T区(T region)。根癌农杆菌通过侵染