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- 2026年05月27日
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充足
- 物种来源：
小鼠
- 运输方式：
活细胞/冻存管
- 规格：
详情电联
英文名：MC3T3-E1 Subclone 14
细胞常规培养及传代
<1>细胞培养
①细胞请于细胞培养箱中培养，大部分细胞是37℃，5% CO2，湿度100%环境下培养的。有极少部分细胞培养条件不一致，请仔细阅读相应的细胞说明书，使用正确的培养基及培养条件。
②细胞于培养瓶或皿中培养，加入适量说明书上标注的细胞相应完全培养基（一般液面高度2-3mm即可）。
<2>细胞传代（以下步骤适用于10cm皿）
①细胞培养至密度达80%以上时即可传代，先将细胞培养基取出3mL用15mL离心管装好，其他培养基全部吸干舍弃；
②培养皿加入2-3mL无菌PBS，轻轻晃动皿，使PBS浸洗到皿底所有部位，PBS吸干舍弃；
③加入1mL胰酶，轻轻晃动皿，使胰酶浸没到皿底所有部位，将皿盖好放入培养箱中消化；
④3min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞不再贴壁，即可加入第一步收集的培养基混匀；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至不贴壁为止；
⑤将细胞悬液均匀分成几份，分别加入不同培养皿中，补加新培养基后放回培养箱培养。
<3>相关问题
①部分细胞在传代后时，会有以下现象：细胞内会有黑色小点、细胞间隙有些颗粒物、培养基漂浮一些死细胞或者细胞长的极慢。出现以上现象时，可以咨询本公司技术人员此现象是否正常及相关处理方式，不要频繁换液，大多数细胞1周换液2-3次即可。
②细胞碎片较多、背景较脏时，贴壁细胞用PBS漂洗两次、悬浮细胞打散后低速离心（900rpm，3min）能有效改善。
③传代比例建议1:2-1:3，长得比较快的细胞可以1：3，比较慢的按1:2传代。传代后，建议不要使用传代前培养所使用的培养基，会有大量细胞碎片甚至导致细胞死亡的风险。
④细胞状态不好或者生长极慢的时候，可以通过增加血清浓度调整细胞状态及生长速度。
⑤请不要随意更换培养基，因实验需要，可以逐步驯化。
⑥使用进口或者活力较强胰酶的客户请注意，消化过度或者吹打过于剧烈会导致细胞受损，从而导致细胞不贴壁或者死亡产生碎片，进而生长缓慢。应注意不要消化过长时间，建议1分钟以内（约30-40s），终止也要彻底，至少6倍胰酶体积的完全培养基终止，终止之后离心去除胰酶后再用新的培养基重悬后传代。
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文献和实验(such as AluI digested cosmid). E. Competent cell preparation For preparation of competent bacterial cells (14), a glycerol cell culture stock of the respective E. coli strain is thawed and added to 50 ml of liquid media. This culture then is preincubated
(such as AluI digested cosmid). E. Competent cell preparation For preparation of competent bacterial cells (14), a glycerol cell culture stock of the respective E. coli strain is thawed and added to 50 ml of liquid media. This culture then is preincubated
扩散。癌细胞扩散的时候是需要指引的，比如，女性高发的乳腺癌可以向骨、肺、脑转移，但很少向肝脏转移。最近研究者发现了乳腺癌肺转移的帮凶—— 「Periostin 蛋白」[1]。 Periostin 蛋白是个什么东东？为什么要背叛主银，帮助癌症扩散转移。 Periostin 最早是日本学者 Takeshita 从小鼠成骨细胞系 cDNA 文库中克隆出的一种具有调节成骨细胞分化和粘附的功能骨粘附分子，被命名为成骨细胞特异
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