| 别名: | pet28a, pet 28a, pET-28a(+) |
|---|---|
| 质粒类型: | 大肠杆菌蛋白表达 |
| 表达水平: | 高 |
| 克隆方法: | 多克隆位点，限制性内切酶 |
| 载体大小: | 5369 bp |
| 5' 测序引物及序列: | T7: 5'-TAATACGACTCACTATAGGG-3' |
| 3' 测序引物序列: | T7t: 5'-GCTAGTTATTGCTCAGCGG-3' |
| 载体标签: | N-His, N-Thrombin, N-T7, C-His |
| 载体抗性: | 卡那霉素 |
| 表达宿主菌: | BL21(DE3) 、BLR(DE3)、BL21(DE3)pLysS |
| 备注: | N端含有Thrombin蛋白酶切位点; pET28a, b, c的差异仅仅存在于多克隆位点处。 |
| 产品目录号: | 69864-3 |
| 稳定性: | 瞬时表达 Transient |
| 组成型: | 组成型 Constitutive |
| 病毒/非病毒: | 非病毒 |
- ¥1000 - 2850
- KALANG
- KL5369p
- 中国/美国
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
—20℃,12个月
- 保质期：
2年
- 库存：
20
- 供应商：
康朗生物
- 英文名：
pet28a, pet 28a, pET-28a(+)
- 规格：
2ug
pET-28a(+)质粒基本信息
pET-28a(+)质粒质粒图谱和多克隆位点信息
pET-28a(+)质粒简介
pET-28a-c(+)载体带有一个N端的His/Thrombin/T7蛋白标签，同时含有一个可以选择的C端His标签。pET28a载体的单一的多克隆位点见上面的环状质粒图谱。注意：载体序列是以pBR322质粒的编码规矩进行编码的，所以T7蛋白表达区在质粒图谱上面是反向的。T7 RNA聚合酶启动的克隆和表达区域在质粒图谱中也被标注了出来。质粒的F1复制子是被定向的，所以在T7噬菌体聚合酶的作用下，包含有蛋白编码序列的病毒粒子能够产生，并启动蛋白表达，同时蛋白表达将被T7终止子序列(Cat. No. 69337-3)的作用下终止蛋白翻译。
pET28a载体序列
LOCUS pET-28a(+) 5369 bp DNA Circular SYNDEFINITION pET-28a(+)ACCESSION KEYWORDS SOURCE ORGANISM other sequences; artificial sequences; vectors.COMMENT This file is created by Vector NTI http://www.biofeng.com/COMMENT ORIGDB|GenBankCOMMENT VNTAUTHORNAME|biofeng.com|COMMENT VNTOAUTHORAD1|Novagen Inc.|FEATURES Location/Qualifiers source 1..5369 /organism="pET-28 a (+)" /mol_type="other DNA" terminator complement(1..129) /label="T7_terminator" misc_feature 69..87 /label="T7_Terminal_primer" misc_feature complement(207..239) /label="T7_leader" misc_feature complement(222..240) /label="Xpress_fwd_primer" misc_feature complement(307..323) /label="T7_transl_en_RBS" misc_feature complement(341..368) /label="lacO" promoter complement(368..386) /label="T7_promoter" gene 418..681 /label="tet (300 - 563)" /gene="tet (300 - 563)" misc_feature complement(470..489) /label="pBRrevBam_primer" CDS 523..1023 /label="ORF frame 1" misc_feature 764..1855 /label="lacI" CDS 896..1855 /label="ORF frame 2" gene 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文献和实验相关实验
晚上每天都有人做报告，我觉得让我收获最大的是Bill Studier的报告。本来这个报告是后来才听到的，但是由于Burgess的模块是唯一的涉及大肠杆菌中表达蛋白的，我把这一段提前来说说。Studier这老哥是Brookhaven National Laboratory的，一生研究T7噬菌体，也是T7 RNA polymerase induction system（pET系列质粒）的发明者。 T7系统在大肠杆菌表达蛋白的应用实在太广泛了，但凡表达蛋白的兄弟姐妹们的不可能不知道这个系统
查、基因筛选及图位克隆有益基因的最好材料，也是永久保存基因资源的最好方法之一。 至于作用就太多了，你自己google一下，发现的是你好多做不了，而不是不知道怎么做？ huangyuan62 楼主,请问能交换你的BAC质粒吗？pBACe3.6,pBeloBAC11等都可以。 本人有以下质粒和菌种,可全部用于交换 pET28a,pET32a,pETDsb,pETGST,pETTrx，pTrc—CKS, pGEX4T
其分子间作用力呈显著下降趋势。 在计算机模拟和蛋白质分子设计的基础上，以野生型TFPI基因为模板，用PCR方法引入突变，构建表达质粒pET―28a(+)―TFPI―Mutl和pET―28a(+)―TFPI―Mut4。然后参照野生型TFPI的基因表达、蛋白质复性及纯化方式，用大肠杆菌制备重组的TFPI―Mutl和TFPI―Mut4。试验证实TFPI―Mutl和TFPI―Mut4保持了与TFPI基本相当的抗凝活性，而且半衰期较TFPl分别延长1．62和4．22倍。
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pET-28a(+)质粒
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