| 出品公司: | ZYbscience |
|---|---|
| 载体名称: | PX335 或 pX335-U6-Chimeric_BB-CBh-hSpCas9n(D10A) |
| 质粒类型: | CRISPR-Cas9载体；基因敲除载体；哺乳动物载体 |
| 高拷贝/低拷贝: | 高拷贝 |
| 插入位点: | 限制性内切酶，多克隆位点 |
| 启动子: | U6 |
| 载体大小: | 8434bp |
| 5' 测序引物及序列: | LKO.1 5'：GACTATCATATGCTTACCGT |
| 3' 测序引物及序列: | BGH Reverse：TAGAAGGCACAGTCGAGG |
| 载体标签: | HA、NLS、SV40NLS(N ter) |
| 载体抗性: | 氨苄青霉素 |
| 筛选标记: | -- |
| 克隆菌株: | Stbl3 |
| 宿主细胞（系）: | 常规哺乳动物细胞 |
| 备注: | A human codon-optimized SpCas9 nickase and chimeric guide RNA expression plasmid.humanized S. pyogenes Cas9 (D10A) nickase |
| 产品目录号: | ZY42335 |
| 稳定性: | 瞬表达 |
| 组成型/诱导型: | 组成型 |
| 病毒/非病毒: | 非病毒 |
- ¥1000
- ZYbscience
- 中国/美国
- ZY42335
- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃低温保存
- 保质期：
三年
- 英文名：
PX335
- 库存：
20
- 供应商：
泽叶生物
载体基本信息
载体质粒图谱和多克隆位点信息
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文献和实验相关实验
手把手教你利用 CRISPR-Cas9 系统精准敲除靶标基因
2 Cas9 - 2 hitKO 系统三、Cas9 - 2 hitKO 系统中涉及到的载体为了达到高效的敲除效率，我们在同一个载体重引入 cas9 酶和两个向导性 RNA。整个系统包括 3 个载体： PX458M ，PX459M 和 EZ-GuideXH。PX458M ，PX459M 除了含有 Cas9 和一个向导性 RNA 插入位点，还引入第二个向导性 RNA 插入位点。EZ-GuideXH 是为插入第二个向导性 RNA 的辅助性载体。PX458M 带有 EGFP 荧光标记; PX459M 带有
9 in this chapter should be relevant for thesefuture efforts as well. 2 Materials 2.1 Molecular Biology Reagents 1. Backbone plasmids: pX330 (U6-chimeric guide RNA + CBh-SpCas9 backbone, Addgene ID 42230), pX335 (U6-chimericguide RNA + CBh-SpCas9n
CRISPR/Cas9 是一种强大的基因组编辑工具，今天我们介绍 CRISPR/Cas9 系统操作。以下操作说明是基于作者冰糖个人实验室操作，仅供参考。 质粒介绍我们使用的是 Feng Zhang 实验室的系统的 pX330 质粒，如下图所示： 酶切系统 37 ℃, 3 hr；Run 1% gel，回收。Elute 到 50 mL H2O。我们利用 BbsI 消化载体形成粘末端，以利于下游 oligo 退火产物的连接；酶切时请充分，且绝对不能加 CIP 处理
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PX335载体
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