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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温
- 保质期:
三年
- 英文名:
pX335
- 库存:
60
- 供应商:
信裕生物
- 规格:
5ug质粒
基本信息
| 质粒类型: | CRISPR/Cas系统 |
|---|---|
| 别名: | pX335-U6-Chimeric_BB-CBh-hSpCas9n(D10A) |
| 启动子: | CAG |
| 载体大小: | 8434 bp (查看载体序列) |
| 载体抗性: | Ampicillin |
订购信息
| 产品编号 | 产品名称 | 规格 | 价格 |
|---|---|---|---|
| XY2092 | pX335 | 5ug质粒 |
¥1000.00 |
质粒图谱
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文献和实验手把手教你利用 CRISPR-Cas9 系统精准敲除靶标基因
2 Cas9 - 2 hitKO 系统三、Cas9 - 2 hitKO 系统中涉及到的载体为了达到高效的敲除效率,我们在同一个载体重引入 cas9 酶和两个向导性 RNA。整个系统包括 3 个载体: PX458M ,PX459M 和 EZ-GuideXH。PX458M ,PX459M 除了含有 Cas9 和一个向导性 RNA 插入位点,还引入第二个向导性 RNA 插入位点。EZ-GuideXH 是为插入第二个向导性 RNA 的辅助性载体。PX458M 带有 EGFP 荧光标记; PX459M 带有
9 in this chapter should be relevant for thesefuture efforts as well. 2 Materials 2.1 Molecular Biology Reagents 1. Backbone plasmids: pX330 (U6-chimeric guide RNA + CBh-SpCas9 backbone, Addgene ID 42230), pX335 (U6-chimericguide RNA + CBh-SpCas9n
CRISPR/Cas9 是一种强大的基因组编辑工具,今天我们介绍 CRISPR/Cas9 系统操作。以下操作说明是基于作者冰糖个人实验室操作,仅供参考。 质粒介绍我们使用的是 Feng Zhang 实验室的系统的 pX330 质粒,如下图所示: 酶切系统 37 ℃, 3 hr;Run 1% gel,回收。Elute 到 50 mL H2O。我们利用 BbsI 消化载体形成粘末端,以利于下游 oligo 退火产物的连接;酶切时请充分,且绝对不能加 CIP 处理
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