| 出品公司: | ZYbscience |
|---|---|
| 载体名称: | pDEST12.2 |
| 质粒类型: | Gateway载体；哺乳动物细胞表达载体 |
| 高拷贝/低拷贝: | 高拷贝 |
| 启动子: | CMV |
| 克隆方法: | Gateway |
| 载体大小: | 7278 bp |
| 5' 测序引物及序列: | SP6 Forward ATTTAGGTGACACTATAG |
| 3' 测序引物及序列: | T7 Reverse GCTAGTTATTGCTCAGCGG |
| 载体标签: | 无标签 |
| 载体抗性: | 氨苄青霉素,氯霉素（仅空载体） |
| 真核筛选标记: | 新霉素（Neomycin） |
| 克隆菌株: | ccdB阳性筛选 DB3.1 感受态细胞， 阴性筛选用OmniMAX2-T1 感受态细胞 |
| 宿主细胞（系）: | 常规细胞系，293、CV-1、CHO等 |
| 备注: | -- |
| 产品目录号: | -- |
| 稳定性: | 稳表达 或 瞬表达 |
| 组成型/诱导型: | 组成型 |
| 病毒/非病毒: | 非病毒 |
- ¥2500
- ZYbscience
- 中国/美国
- ZY
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃低温保存
- 保质期：
三年
- 英文名：
pDEST12.2
- 库存：
20
- 供应商：
泽叶生物
载体基本信息
载体质粒图谱和多克隆位点信息
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文献和实验相关实验
蛋白相互作用的一种有效工具。在ProQuest™系统中加入GateWay™技术，使您仅通过一个克隆步骤就可以在多个表达系统中表达可能的相互作用子蛋白，从而简化了下游的基因分析 ProQuest™工作原理 ProQuest™系统依靠报告基因的转录激活来鉴定蛋白相互作用。将一个基因克隆到"诱饵"载体，pDEST™ 32，并和GAL4蛋白的DNA结合域（DBD）表达为融合蛋白。将第二个基因或者编码可能的相互作用子蛋白的cDNA文库克隆到"猎物"载体，pDEST™ 22，同GAL4的转录
】1. 消化缓冲液：100 mM NaCl，10 mM Tris.Cl (pH8.0) 25 mM EDTA (pH8.0)，0.5% (w/v) SDS，0.1 mg/mL 蛋白酶 K。2. 7.5mol/L 乙酸铵。3. 100% 乙醇。4. 酚/氯仿/异戊醇。【实验方法与步骤】1. 将新鲜组织剪成小块并立即置于液氮中冻存；2. 将 200 mg～1 g 的组织用预冷的研钵研碎，或用锤子将其捣为细粉末，每 100 mg 组织用 1.2 mL 消化缓冲液悬浮，然后于 50℃ 摇荡温育 12~18 h
质粒，则有些克隆载体质粒便能有效地接合转化受体细胞。因此，首先将具有接合功能的辅助质粒转移至含有重组质粒的细胞中，然后将这种供体细胞与难以用上述转化方法转化的受体细胞进行混合，促使两者发生接合作用，最终导致重组质粒进入受体细胞。1.2转化率及其影响因素 转化率是转化（包括感染）效率的评估指标，通常有两种形式表征转化率，一是在待转化DNA分子数大于受体细胞数的条件下，转化细胞与细胞总数之比，例如在标准条件下，利用Ca2 诱导法转化质粒DNA的最大转化率为10-3 ，即平均每一千个受体细胞中有一个细胞接纳了质粒
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pDEST12.2载体
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