| 出品公司: | ZYbscience |
|---|---|
| 载体名称: | pcDNA6/BioEase-DEST |
| 质粒类型: | Gateway载体；哺乳动物表达载体 |
| 高拷贝/低拷贝: | 高拷贝 |
| 启动子: | CMV |
| 克隆方法: | Gateway |
| 载体大小: | 6959bp |
| 5' 测序引物及序列: | T7 Forward: 5’-TAATACGACTCACTATAGGG-3’ |
| 3' 测序引物及序列: | BGH Reverse: 5-TAGAAGGCACAGTCGAGG-3 |
| 载体标签: | BioEase Tag （N-端） |
| 载体抗性: | 氨苄青霉素、氯霉素（仅空载体） |
| 筛选标记: | Blasticidin |
| 克隆菌株: | ccdB阳性筛选 DB3.1 感受态细胞， 阴性筛选用 OmniMAX2-T1 感受态细胞 |
| 宿主细胞（系）: | 常规细胞系，如293、Hela等 |
| 备注: | pcDNA6/BioEase-DEST载体是cDNA的表达与克隆载体； 表达的重组蛋白是生物素标记的融合蛋白，生物素标记提供了一种高效的检测和纯化手段； 含EK (Enterokinase)切割位点。 |
| 产品目录号: | ZY980-01 |
| 稳定性: | 瞬表达 或 稳表达 |
| 组成型: | 组成型 |
| 病毒/非病毒: | 非病毒 |
- ¥3000
- ZYbscience
- 中国/美国
- ZY
- 2025年07月15日
11 年钻石会员
企业认证
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃低温保存
- 保质期：
三年
- 英文名：
pcDNA6/BioEase-DEST
- 库存：
20
- 供应商：
泽叶生物
载体基本信息
载体质粒图谱和多克隆位点信息
载体简介
生物素酰化重组蛋白表达系统
哺乳动物表达载体pcDNA6/BioEase表达生物素酰化的融合蛋白，提供了一种简便、高效的检测和纯化手段。BioEase标签是含72个氨基酸残基的肽段，体内的生物素连接酶系统（ Biotin Protein Ligase），使这段肽链上特定的赖氨酸残基生物素酰化。生物素酰化的融合蛋白可以用链霉亲和素琼脂糖珠进行纯化。
The pcDNA6-BioEase Gateway Biotinylation System provides an easy, efficient method for expressing, purifying, and detecting biotinylated recombinant proteins. The pcDNA6/BioEase-DEST vector (Figure 1) incorporates a 72 amino acid sequence from K. pneumoniae that directs in vivo biotinylation of a specific lysine residue. This K. pneumoniae tag is recognized and efficiently biotinylated in vivo by a native mammalian system similar to the enzyme Biotin Protein Ligase (BPL) in E. coli(1). Proteins produced from the pcDNA6/BioEase-DEST vector are expressed as fusion proteins to this sequence. Biotinylated fusion proteins can be purified by streptavidin agarose, detected on western blots using streptavidin-HRP or streptavidin-AP conjugates, or visualized in mammalian cells by immunofluorescence with a streptavidin-FITC conjugate (Figure 2). In addition to the 72 amino acid K. pneumoniae sequence, the pcDNA6/BioEase-DEST vector includes the following features:
attR sites for fast and efficient recombination with any attL-flanked Gateway entry vector
The CMV promoter for high-level expression of the recombinant fusion protein
An enterokinase cleavage site for efficient removal of the N-terminal BioEase fusion tag
Gateway哺乳动物表达载体选择指南：
N-His标签 G418筛选
C-黄色荧光蛋白 Blasticidin S筛选
C-绿色荧光蛋白 Blasticidin S筛选
pcDNA6.2/BioEase-DEST N-生物素 Blasticidin S筛选
载体序列
GACGGATCGGGAGATCTCCCGATCCCCTATGGTCGACTCTCAGTACAATCTGCTCTGATGCCGCATAGTT AAGCCAGTATCTGCTCCCTGCTTGTGTGTTGGAGGTCGCTGAGTAGTGCGCGAGCAAAATTTAAGCTACA ACAAGGCAAGGCTTGACCGACAATTGCATGAAGAATCTGCTTAGGGTTAGGCGTTTTGCGCTGCTTCGCG ATGTACGGGCCAGATATACGCGTTGACATTGATTATTGACTAGTTATTAATAGTAATCAATTACGGGGTC ATTAGTTCATAGCCCATATATGGAGTTCCGCGTTACATAACTTACGGTAAATGGCCCGCCTGGCTGACCG CCCAACGACCCCCGCCCATTGACGTCAATAATGACGTATGTTCCCATAGTAACGCCAATAGGGACTTTCC ATTGACGTCAATGGGTGGACTATTTACGGTAAACTGCCCACTTGGCAGTACATCAAGTGTATCATATGCC AAGTACGCCCCCTATTGACGTCAATGACGGTAAATGGCCCGCCTGGCATTATGCCCAGTACATGACCTTA TGGGACTTTCCTACTTGGCAGTACATCTACGTATTAGTCATCGCTATTACCATGGTGATGCGGTTTTGGC AGTACATCAATGGGCGTGGATAGCGGTTTGACTCACGGGGATTTCCAAGTCTCCACCCCATTGACGTCAA TGGGAGTTTGTTTTGGCACCAAAATCAACGGGACTTTCCAAAATGTCGTAACAACTCCGCCCCATTGACG CAAATGGGCGGTAGGCGTGTACGGTGGGAGGTCTATATAAGCAGAGCTCTCTGGCTAACTAGAGAACCCA CTGCTTACTGGCTTATCGAAATTAATACGACTCACTATAGGGAGACCCAAGCTGGCTAGCGTTTAAACTT AAGCTTACCATGGGCGCCGGCACCCCGGTGACCGCCCCGCTGGCGGGCACTATCTGGAAGGTGCTGGCCA GCGAAGGCCAGACGGTGGCCGCAGGCGAGGTGCTGCTGATTCTGGAAGCCATGAAGATGGAAACCGAAAT CCGCGCCGCGCAGGCCGGGACCGTGCGCGGTATCGCGGTGAAAGCCGGCGACGCGGTGGCGGTCGGCGAC ACCCTGATGACCCTGGCGGGCTCTGGATCCGATCTGTACGACGATGACGATAAGGTACATCAAACAAGTT TGTACAAAAAAGCTGAACGAGAAACGTAAAATGATATAAATATCAATATATTAAATTAGATTTTGCATAA AAAACAGACTACATAATACTGTAAAACACAACATATCCAGTCACTATGGCGGCCGCATTAGGCACCCCAG GCTTTACACTTTATGCTTCCGGCTCGTATAATGTGTGGATTTTGAGTTAGGATCCGGCGAGATTTTCAGG AGCTAAGGAAGCTAAAATGGAGAAAAAAATCACTGGATATACCACCGTTGATATATCCCAATGGCATCGT AAAGAACATTTTGAGGCATTTCAGTCAGTTGCTCAATGTACCTATAACCAGACCGTTCAGCTGGATATTA CGGCCTTTTTAAAGACCGTAAAGAAAAATAAGCACAAGTTTTATCCGGCCTTTATTCACATTCTTGCCCG CCTGATGAATGCTCATCCGGAATTCCGTATGGCAATGAAAGACGGTGAGCTGGTGATATGGGATAGTGTT CACCCTTGTTACACCGTTTTCCATGAGCAAACTGAAACGTTTTCATCGCTCTGGAGTGAATACCACGACG ATTTCCGGCAGTTTCTACACATATATTCGCAAGATGTGGCGTGTTACGGTGAAAACCTGGCCTATTTCCC TAAAGGGTTTATTGAGAATATGTTTTTCGTCTCAGCCAATCCCTGGGTGAGTTTCACCAGTTTTGATTTA AACGTGGCCAATATGGACAACTTCTTCGCCCCCGTTTTCACCATGGGCAAATATTATACGCAAGGCGACA AGGTGCTGATGCCGCTGGCGATTCAGGTTCATCATGCCGTCTGTGATGGCTTCCATGTCGGCAGAATGCT TAATGAATTACAACAGTACTGCGATGAGTGGCAGGGCGGGGCGTAAACGCGTGGATCCGGCTTACTAAAA GCCAGATAACAGTATGCGTATTTGCGCGCTCGCGAACCGGTGTATACCCGAAGTATGTCAAAAAGAGGTG TGCTATGAAGCAGCGTATTACAGTGACAGTTGACAGCGACAGCTATCAGTTGCTCAAGGCATATATGATG TCAATATCTCCGGTCTGGTAAGCACAACCATGCAGAATGAAGCCCGTCGTCTGCGTGCCGAACGCTGGAA AGCGGAAAATCAGGAAGGGATGGCTGAGGTCGCCCGGTTTATTGAAATGAACGGCTCTTTTGCTGACGAG AACAGGGACTGGTGAAATGCAGTTTAAGGTTTACACCTATAAAAGAGAGAGCCGTTATCGTCTGTTTGTG GATGTACAGAGTGATATTATTGACACGCCCGGGCGACGGATGGTGATCCCCCTGGCCAGTGCACGTCTGC TGTCAGATAAAGTCTCCCGTGAACTTTACCCGGTGGTGCATATCGGGGATGAAAGCTGGCGCATGATGAC CACCGATATGGCCAGTGTGCCGGTCTCCGTTATCGGGGAAGAAGTGGCTGATCTCAGCCACCGCGAAAAT GACATCAAAAACGCCATTAACCTGATGTTCTGGGGAATATAAATGTCAGGCTCCGTTATACACAGCCAGT CTGCAGGTCGACCATAGTGACTGGATATGTTGTGTTTTACAGTATTATGTAGTCTGTTTTTTATGCAAAA TCTAATTTAATATATTGATATTTATATCATTTTACGTTTCTCGTTCAGCTTTCTTGTACAAAGTGGTGAT AATTAATTAAGATCTAGAGGGCCCGTTTAAACCCGCTGATCAGCCTCGACTGTGCCTTCTAGTTGCCAGC CATCTGTTGTTTGCCCCTCCCCCGTGCCTTCCTTGACCCTGGAAGGTGCCACTCCCACTGTCCTTTCCTA ATAAAATGAGGAAATTGCATCGCATTGTCTGAGTAGGTGTCATTCTATTCTGGGGGGTGGGGTGGGGCAG GACAGCAAGGGGGAGGATTGGGAAGACAATAGCAGGCATGCTGGGGATGCGGTGGGCTCTATGGCTTCTG AGGCGGAAAGAACCAGCTGGGGCTCTAGGGGGTATCCCCACGCGCCCTGTAGCGGCGCATTAAGCGCGGC GGGTGTGGTGGTTACGCGCAGCGTGACCGCTACACTTGCCAGCGCCCTAGCGCCCGCTCCTTTCGCTTTC TTCCCTTCCTTTCTCGCCACGTTCGCCGGCTTTCCCCGTCAAGCTCTAAATCGGGGCATCCCTTTAGGGT TCCGATTTAGTGCTTTACGGCACCTCGACCCCAAAAAACTTGATTAGGGTGATGGTTCACGTAGTGGGCC ATCGCCCTGATAGACGGTTTTTCGCCCTTTGACGTTGGAGTCCACGTTCTTTAATAGTGGACTCTTGTTC CAAACTGGAACAACACTCAACCCTATCTCGGTCTATTCTTTTGATTTATAAGGGATTTTGGGGATTTCGG CCTATTGGTTAAAAAATGAGCTGATTTAACAAAAATTTAACGCGAATTAATTCTGTGGAATGTGTGTCAG TTAGGGTGTGGAAAGTCCCCAGGCTCCCCAGGCAGGCAGAAGTATGCAAAGCATGCATCTCAATTAGTCA GCAACCAGGTGTGGAAAGTCCCCAGGCTCCCCAGCAGGCAGAAGTATGCAAAGCATGCATCTCAATTAGT CAGCAACCATAGTCCCGCCCCTAACTCCGCCCATCCCGCCCCTAACTCCGCCCAGTTCCGCCCATTCTCC GCCCCATGGCTGACTAATTTTTTTTATTTATGCAGAGGCCGAGGCCGCCTCTGCCTCTGAGCTATTCCAG AAGTAGTGAGGAGGCTTTTTTGGAGGCCTAGGCTTTTGCAAAAAGCTCCCGGGAGCTTGTATATCCATTT TCGGATCTGATCAGCACGTGTTGACAATTAATCATCGGCATAGTATATCGGCATAGTATAATACGACAAG GTGAGGAACTAAACCATGGCCAAGCCTTTGTCTCAAGAAGAATCCACCCTCATTGAAAGAGCAACGGCTA CAATCAACAGCATCCCCATCTCTGAAGACTACAGCGTCGCCAGCGCAGCTCTCTCTAGCGACGGCCGCAT CTTCACTGGTGTCAATGTATATCATTTTACTGGGGGACCTTGTGCAGAACTCGTGGTGCTGGGCACTGCT GCTGCTGCGGCAGCTGGCAACCTGACTTGTATCGTCGCGATCGGAAATGAGAACAGGGGCATCTTGAGCC CCTGCGGACGGTGCCGACAGGTGCTTCTCGATCTGCATCCTGGGATCAAAGCCATAGTGAAGGACAGTGA TGGACAGCCGACGGCAGTTGGGATTCGTGAATTGCTGCCCTCTGGTTATGTGTGGGAGGGCTAAGCACTT CGTGGCCGAGGAGCAGGACTGACACGTGCTACGAGATTTCGATTCCACCGCCGCCTTCTATGAAAGGTTG GGCTTCGGAATCGTTTTCCGGGACGCCGGCTGGATGATCCTCCAGCGCGGGGATCTCATGCTGGAGTTCT TCGCCCACCCCAACTTGTTTATTGCAGCTTATAATGGTTACAAATAAAGCAATAGCATCACAAATTTCAC
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验相关实验
用293FT细胞系和相关的ViraPower™ 试剂制备的高滴度的慢病毒储备液，进行有效的和可控制的导入。一旦制备好了慢病毒储备液，就可以转染细胞以观测RNAi反应（图9）。pLenti6/BLOCK-iT™-DEST 慢病毒 RNAi 载体（ pLenti6/BLOCK-iT™-DEST Lentiviral RNAi vector）提供能够长期观察稳定RNAi效应的能力。这个载体包含包装U6RNAi框到病毒所需的全部的元件，因而你能够转染shRNA到正在分裂、难于转染和不分裂的细胞中（图10
回收试剂盒 Axygen 琼脂糖 Biowest DNA ladder Fermentas （2）X基因慢病毒载体的构建 X基因基因由Transheep全基因合成，构建于载体PUC57中。 PUC57-X基因 EcoRI/BamHI酶切结果： 酶切完成后进行胶回收 2. 载体用pCDNA3.1双酶切，酶切体系如下。 20ul酶切
wangch84 各位高手，兄弟最近忙于质粒构建，意图将一段长约4000 bp的片段，通过BamH1和EcoR1两个酶切位点连接到pcDNA3.1+载体上。情况如下： 1. 通过LA Taq酶扩增，并纯化回收目的片段（引物中带有酶切位点，保护性碱基＝3，上游带有Kozak序列）；由于回收效率很高，所以在进行下一步双酶切时只加了12 μl的目的片段，H2O 20 μl，10 X K BUFFER 4 μl，两种酶各2 μl，37℃作用过夜（12-14 h
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
pcDNA6/BioEase-DEST载体
¥3000
