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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温
- 保质期:
三年
- 英文名:
pET-37b(+)
- 库存:
60
- 供应商:
信裕生物
- 规格:
5ug质粒
基本信息
| 质粒类型: | 大肠杆表达隆载体 |
|---|---|
| 克隆方法: | 多克隆位点,限制性内切酶 |
| 5' 测序引物及序列:T7: | T7: 5'-TAATACGACTCACTATAGGG-3' |
| 3' 测序引物序列: | T7t: 5'-GCTAGTTATTGCTCAGCGG-3' |
| 载体大小: | 5932 bp (查看载体序列) |
| 载体抗性: | Kanamycin(卡那霉素) |
订购信息
| 产品编号 | 产品名称 | 规格 | 价格 |
|---|---|---|---|
| XY2064 | pET-37b(+) | 5ug质粒 |
¥1000.00 |
质粒图谱
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文献和实验编码区的基因片段,其由5'末端的stat密码子(ATG)和3'末端的终止密码子(TAA,TAG或TGA)结合。然后将目的基因片段插入pMD18-T载体中以构建重组质粒,通过DNA测序鉴定。用指定的酶消化重组pMD18-T质粒,并通过以下方案将检索到的目的DNA片段亚克隆到pET-32α(+)载体中以产生重组表达载体。将约129bp的TBO基因片段插入pET-32α(+)载体(5900bp)用相同的限制酶在37℃消化pET-32α(+)载体和重组pMD18-T载体1小时,然后通过在65℃温育10分钟
相关专题 1)噬菌体DE3溶源化的菌株如BL21(DE3)是最常用的表达菌株,噬菌体DE3是λ噬菌体的衍生株,构建好的表达载体 可以直接转入表达菌株中,诱导蛋白的表达方式与lac启动子一样都是IPTG诱导。 2)表达菌株BL21(DE3)上带有lacI基因,T7 RNA 聚合酶编码基因以及lacUV5启动子,lacUV5启动子可以启动T7 RNA 聚合酶的表达; 3)表达质粒 如pET-28质粒带有T7启动子和编码阻遏
( DE3 )表达的活性蛋白比其它宿主菌高 10 倍以上。 Origami 宿主菌与氨苄抗性质粒相容,可用于 pET-32 载体,硫氧还蛋白标签能够进一步增强在胞浆内形成二硫键。 TrxB 和 gor 突变可分别用卡那霉素和四环素选择,因此该菌株建议用于带氨苄抗性标记 bla 的 pET 质粒。 Origami B 宿主菌来源于 BL21 lacZY 突变株,还带有与原始 Origami 菌株相同的 TrxB / gor 突变。 Origami B 菌株集 BL21 、 Tuner
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