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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温
- 保质期:
三年
- 英文名:
pGFP315
- 库存:
60
- 供应商:
信裕生物
- 规格:
5ug质粒
基本信息
| 质粒类型: | 枯草芽孢杆菌表达载体 |
|---|---|
| 骨架载体: | pHT315 |
| 克隆方法: | 多克隆位点,限制性内切酶 |
| 载体标签: | GFP |
订购信息
| 产品编号 | 产品名称 | 规格 | 价格 |
|---|---|---|---|
| XY1858 | pGFP315 | 5ug质粒 |
¥1500.00 |
载体描述
根据绿色荧光蛋白基因和枯草芽孢杆菌木糖诱导型启动子PxylR序列, 分别设计两对特异引物primers PxyF/R 和primers gfpF/R,扩增获得了完整的启动子PxylR和gfp基因序列。进一步以上述产物混合物为模板,以primer PxyF/ primer gfpR做引物进行重迭PCR,获得了PxylR-gfp重组翻译融合表达盒。经Sph I和Kpn I完全酶切 后,将PxylR-gfp表达盒插入大肠杆菌-苏云金芽孢杆菌穿梭载体pHT315,得到相应的重组表达质粒pGFP315。
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文献和实验选择原核表达了。1、用clontech的pGFP载体可以做原核表达吗?2、先把目标基因连接到GFP载体上,切下来,连接到pET载体上,可以吗?3、为什么pET系列载体不带有GFP基因啊?E.coli:clontech的pGFP载体是原核表达载体,应该符合你的实验要求,但是我没有使用过,因此对其具体操作注意不是很了解。如果你一定要求使用pET载体表达带有GFP报告基因的目的基因,在进行载体构建时,加入GFP报告基因与目的基因融合应该是可行的。不过这样构建起来也是挺麻烦的,不如使用商品化载体方便
构建 以5'-CTTCTAGACCA GCC AGG AGA AAT CCA-3’为5’引物(下划线为引入的XbaI位点),5'-AAGGTACCAAA TTT CTG AAC GCA GC-3’作为3’引物(下划线为引入的KpnI位点)进行PCR扩增,将扩增到的片断克隆到pGFP221上,构成pGFP221-OsAGAP瞬时表达载体。 2. 基因枪轰击洋葱表皮观察GFP瞬时表达 1) 实验材料准备 撕取洋葱内表皮,置于高渗培养液(MS无机盐、40g/L
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