- ¥1000
- XYbscience
- 中国/美国
- XY1297
- 2025年07月15日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
常温
- 保质期：
三年
- 英文名：
pBV220
- 库存：
60
- 供应商：
信裕生物
- 规格：
5ug质粒
基本信息
| 质粒类型: | 大肠杆菌表达载体 |
|---|---|
| 高拷贝/低拷贝: | 高拷贝 |
| 启动子: | pR/pL |
| 克隆方法: | 多克隆位点，限制性内切酶 |
| 载体大小: | 3666 bp (查看载体序列) |
| 5' 测序引物及序列: | pBV220-F: 5′-AAGAAGGGCAGCATTCAAAG-3‘ |
| 3' 测序引物及序列: | pBV220-R: 5′-CTGCGTTCTGATTTAATCTG-3‘ |
| 载体抗性: | Ampicillin (氨苄青霉素) |
订购信息
| 产品编号 | 产品名称 | 规格 | 价格 |
|---|---|---|---|
| XY1297 | pBV220 | 5ug质粒 |
¥1000.00 |
质粒图谱
载体描述
pBV220载体是我国预防医学科学院病毒研究所自行构建的大肠杆菌温控表达载体,目前仍在广泛使用.
pBV220质粒的SD sequence（用于结合原核生物核糖体的序列）后紧跟多克隆酶切位点，便于插入带起始ATG的外源基因，可表达非融合蛋白。
载体含有强的转录终止子可 防止出现"通读"现象，有利于质粒-宿主系统的稳定。
载体pBV220为3.7Kb，有利于增加其拷贝数及容量。pBV220含有PL启动子和编码对该启动子具有抑制作用而又对温度敏感的cI蛋白基因cIts857调控基因cI，因此可用温度对插入其中的外源基因的转录进行调控。
温控型原核表达载体，高拷贝数，大容量，强启动子，强转录终止子，可在任何受体菌中诱导表达。
pBV220载体是λPL/PR-cI857温度敏感系统表达载体，能够在42 ℃表达非融合的目的蛋白。
在利用pBV220载体进行质粒构建的时候，需要加入ATG起始密码子。
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文献和实验温度诱导型原核表达载体pBV220工作原理及全序列 实验原理 PLPR启动子是大肠杆菌l噬菌体中控制早期转录的启动子，具有极强的起始RNA转录的功能，基因工程中常用它来构建高效表达载体，它受抑制物CI蛋白的负调控。在实际中CI蛋白被改造成温度敏感型(CIts)，由DNA片段CIts857（857bp长）编码。CIts在30℃时具有抑制启动子的活性，在42℃时失活而失去抑制启动子的活性，因此，改变工程菌的培养温度即可控制目的基因的表达，这一点比用诱导剂诱导表达的系统要节省操作步骤和成本
用于克隆筛选).因为引物上带了EcoRV位点,又可以进一步做成T载体,再把基因克进去,如此反复... 关键是T载体要制备的好，筛选的时候多挑几个克隆,如果需要定向克隆基因的话可利用载体上的引物筛选之,然后利用基因内部合适的酶切位点来验证... 欢迎交流! qianjing930 我做过三段重复片段的串联,用的是pBV220载体. 第一对引物为EcoRI_KpnI_____BamHI;第一段单体插入pBV220载体中的EcoRI
表达效率往往更高。 将IL基因以5’端 Eco RI和3’端 Bam HI酶切位点插入pBV220载体多克隆位点中，转化到大肠杆菌JMl03内，便能通过温度的变换控制CI蛋白的活性，继而调节启动子的活性，使IL基因连同其5’端上游带SD序列转录成mRNA并转录终止于rrnB位点，SD序列与ATG的间距为6bp，mRNA作为模板使核糖体高效翻译出IL产物。 实验材料和试剂 （一）实验材料
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