| 出品公司: | -- |
|---|---|
| 载体名称: | pBV221 |
| 质粒类型: | 原核表达载体，温控型表达载体，热诱导表达载体 |
| 高拷贝/低拷贝: | 高拷贝 |
| 克隆方法: | 限制性内切酶，多克隆位点 |
| 启动子: | pR/pL |
| 载体大小: | 3.7 kb |
| 5' 测序引物及序列: | pBV220-F: 5′-AAGAAGGGCAGCATTCAAAG-3‘ |
| 3' 测序引物及序列: | pBV220-R: 5′-CTGCGTTCTGATTTAATCTG-3‘ |
| 载体标签: | -- |
| 载体抗性: | 氨苄青霉素 |
| 克隆菌株: | DH5α 等 |
| 备注: | |
| 产品目录号: | -- |
| 稳定性: | 稳表达 |
| 组成型/诱导型: | 诱导表达 |
| 病毒/非病毒: | 非病毒 |
- ¥1000
- ZYbscience
- 中国/美国
- ZY
- 2025年07月11日
11 年钻石会员
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃低温保存
- 保质期：
三年
- 英文名：
pBV221
- 库存：
20
- 供应商：
泽叶生物
载体基本信息
载体质粒图谱和多克隆位点信息
载体简介
一个高效的大肠杆菌蛋白表达载体首先要有强的启动子，即RNA聚合酶的结合部位，而且这个启动子最好是可以调控的；此外，还需要SD序列，即核糖体结合位点。SD序列的组成及其与起始密码子AUG间的距离，都会显著地影响翻译水平。转录终止序列对稳定宿主载体系统非常重要，因为即使插入片段不含转录终止信号，由此亦可避免发生通读所造成的质粒不稳定。大肠杆菌的转录终止有依赖和不依赖rho蛋白两种形式，表达载体最好是后者，高效表达质粒pBV221具有以上特点，经常被用于多种蛋白表达。
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文献和实验相关实验
温度诱导型原核表达载体pBV220工作原理及全序列 实验原理 PLPR启动子是大肠杆菌l噬菌体中控制早期转录的启动子，具有极强的起始RNA转录的功能，基因工程中常用它来构建高效表达载体，它受抑制物CI蛋白的负调控。在实际中CI蛋白被改造成温度敏感型(CIts)，由DNA片段CIts857（857bp长）编码。CIts在30℃时具有抑制启动子的活性，在42℃时失活而失去抑制启动子的活性，因此，改变工程菌的培养温度即可控制目的基因的表达，这一点比用诱导剂诱导表达的系统要节省操作步骤和成本
用于克隆筛选).因为引物上带了EcoRV位点,又可以进一步做成T载体,再把基因克进去,如此反复... 关键是T载体要制备的好，筛选的时候多挑几个克隆,如果需要定向克隆基因的话可利用载体上的引物筛选之,然后利用基因内部合适的酶切位点来验证... 欢迎交流! qianjing930 我做过三段重复片段的串联,用的是pBV220载体. 第一对引物为EcoRI_KpnI_____BamHI;第一段单体插入pBV220载体中的EcoRI
表达效率往往更高。 将IL基因以5’端 Eco RI和3’端 Bam HI酶切位点插入pBV220载体多克隆位点中，转化到大肠杆菌JMl03内，便能通过温度的变换控制CI蛋白的活性，继而调节启动子的活性，使IL基因连同其5’端上游带SD序列转录成mRNA并转录终止于rrnB位点，SD序列与ATG的间距为6bp，mRNA作为模板使核糖体高效翻译出IL产物。 实验材料和试剂 （一）实验材料
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pBV221载体
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