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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期:
6-12months
- 英文名:
Recombinant Receptor Interacting Serine Threonine Kinase 1 (RIPK1)
- 库存:
大量
- 供应商:
泽叶生物
- 规格:
50ug/100ug/1mg
上海泽叶生物科技有限公司是一家集研发、生产和销售于一体的生命科学实验室产品创新性高科技企业。主要从事免疫学,重组蛋白,细胞因子,抗原/多肽/蛋白等产品主要包括免疫调节蛋白、白细胞介素、CSFs、生长因子、干扰素、Chemokines 、Adipokines 、TGFß / BMP Proteins、神经因子、FGFs和TNF配体/受体防御因子等。并代理销售Amresco,qiagen Millipore,eBioscience,Sigma,SANTA,Sciencell,R&D、GBD、ATCC、HYCLONE, CELLutions Biosystems INC , Neuromics , Chemicon, Equitech-bio, Biovision, Promega, Kamiya, Prospec, Cytoskeleton, Novagen, SurModics, Cytelligen LONZA等二十多家国外知名品牌,致力于为广大高校、科研院所和企事业单位提供一流的科研试剂和完善的技术服务。
经甲醛固定的部分组织细胞,因固定过程中可能会形成醛键或羧甲基而封闭部分抗原决定簇,使免疫组化标记敏感性明显降低,因此在染色前,有些抗原需进行修复或暴露。
抗原修复方法可分为化学方法和物理方法。化学方法是以酶消化方法,常用胰蛋白酶及胃蛋白酶,配制浓度与消化时间要适度。常用的物理方法有单纯加热、微波处理和高压加热。在选用这三种方法时,浸泡切片的缓冲液的离子强度和pH、加热的温度和时间均影响着抗原修复效果。
1、pH的应用范围及选择
抗原修复液的pH非常重要,有效的抗原修复pH要比修复液的化学成分更重要,同样的修复液随着pH的升高染色的强度逐渐增强,但最佳pH范围为6.0-10.0。目前大家公认的最好的抗原修复液是pH6.0的柠檬酸盐缓冲液和pH8.0的EDTA缓冲液。作为通用修复液碱性pH的修复液要比酸性的有效,而对固定很长时间旧的存档组织,酸性pH的修复液则优于碱性的修复液。
2、抗原修复时应选择最佳温度
70-90℃的温度对未经固定的蛋白质可发生变性,但经福尔马林固定的蛋白质,温度必须达到92℃以上方能使其变性。研究结果显示,温度为92-98℃是合适的,95℃效果最好。
3、抗原修复液必须遵循自然降温规律,否则效果不好或达不到抗原修复的目的
抗原修复持续时间过后,取出放于室温中让其慢慢地降温,绝对不能为了争取时间,强行用冰块或冷水使其降温。这是因为当高温中的抗原蛋白分子链脱离了其他的束缚或联结,要有一个自然环境让其自然放松下来,随着温度的降低,它们会慢慢地恢复原来的形态和构型。
4、尽量使用足量的抗原修复液
应用于抗原修复的液体,一定要充足,防止切片干涸。应用大量的抗原修复液时,由于它的量较大,可延缓液体的沸腾时间,增加切片受微波辐射的量,对抗原修复将达到彻底。
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文献和实验Cell Reports:浙大蒋晞课题组发文揭示阿片受体激动剂调控白血病表观遗传学修饰的新机制
2 表达,降低 AML 细胞对 OPA1 的敏感性;过表达 EGR1 能够增加 OPA1 的敏感性。以上结果提示阿片受体信号通路可能通过活化 EGR1,从转录水平上调 TET2。 为了探索 TET2 下游的调控通路,作者对 OPA1 或 DMSO 处理的 THP-1 细胞进行了 5 hmC 测序和转录组测序。结果分析发现:OPA1 处理使 NF-κB 信号通路富集,通路重要调节因子 TRAF2,BLNK,RIPK1 等表达水平明显升高。OPA1 处理后,TRAF2 的转录
1. 前言 蛋白质翻译后磷酸化修饰是影响真核细胞每一个细胞内活动过程的最丰富的细胞调节形式。一个蛋白质的磷酸化能引起结构、稳定性、酶活,与其他分子之间相互作用的能力或其亚细胞定位的改变。蛋白激酶催化可逆的蛋白质底物的磷酸化,作用在其丝氨 酸、苏氨酸和酪氨酸残基位点上。如在拟南芥中,丝氨酸/苏氨酸激酶占整个蛋白质组 的 4% [1] ,但对它们的生物学功能还不十分了解。因此,我们需要能开展蛋白激酶全球分析的高通量蛋白质组学方法[ 2,3] 来鉴定下游底物。 用于确定磷酸化共有
。已经检测出在放射性标记的人p52 GST融合蛋白和诸如核蛋白或从HeLa细胞中分离的丝氨酸-精氨酸蛋白片段的固定捕获蛋白之间的特定相互作用。另外,也展示了DNA、RNA或低分子量的配体与固定分子的相互作用。这些阵列可以进一步微小化,因此有可能以微阵列的形式完成。 Zhu等人的最近工作证明对蛋白组学分析的阵列方法的非常能力。作者从S. cerevisiae中纯化5800不同种重组蛋白后,生产了包含该微生物90%基因的基因产物的复杂蛋白芯片。这些微阵列能用于研究全基因组范围内的蛋白-蛋白相互作用
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