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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温
- 保质期:
三年
- 英文名:
pSL-MS2-12X
- 库存:
60
- 供应商:
信裕生物
基本信息
| 质粒类型: | 原核表达载体 |
|---|---|
| 载体大小: | 4048 bp (查看载体序列) |
| 载体抗性: | Ampicillin |
订购信息
| 产品编号 | 产品名称 | 规格 | 价格 |
|---|---|---|---|
| XY8073 | pSL-MS2-12X | 5ug质粒 |
¥1000.00 |
质粒图谱
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文献和实验得较明显的外源表达上调。 但这条路线受到载体容量影响。对于较大的基因,或者希望研究内源表达调控的项目,可以关注另一条路线:CRISPR-SAM。 SAM不是向细胞里额外加入一份完整目的基因,而是通过dCas9-VP64、带MS2结构的sgRNA以及MS2-p65-HSF1激活辅助蛋白,在目标基因启动子附近富集转录激活因子,从而增强内源表达。 图4|CRISPR-SAM系统组成及内源基因激活原理 四、CDS过表达和SAM,到底怎么选? 如果目标是在适当条件下获得较高水平的外源表达,CDS过表达通常更
。2)模板的浓度:RT-PCR实验既可以选用总RNA,又可以选用mRNA,其浓度应在1pg-1ug之间选择。对于低模板浓度,可以增加适量的MS2或用alternativeRNA作为载体进行测定。3)对照设置:每一引物都应设有阴性对照,阳性对照和污染对照。4.杂交探针测定DNA1)MgCl2的浓度:在2-4mM的基础上加0.5-1.0mM,但是不要超过2.0mM。2)杂交探针的浓度:初次实验每个探针用0.2uM,如果信号强度达不到要求,可以增加至0.4uM。3)对照设置:每一引物都要设阴性对照,每一探针
总RNA,又可以选用mRNA,其浓度应在1pg-1ug之间选择。对于低模板浓度,可以增加适量的MS2或用alternativeRNA作为载体进行测定。3)对照设置:每一引物都应设有阴性对照,阳性对照和污染对照。4、杂交探针测定DNA 1)MgCl2的浓度:在2-4mM的基础上加0.5-1.0mM,但是不要超过2.0mM。2)杂交探针的浓度:初次实验每个探针用0.2uM,如果信号强度达不到要求,可以增加至0.4uM。3)对照设置:每一引物都要设阴性对照,每一探针都要设阴性对照。每次实验都要设阳性
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