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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温
- 保质期:
三年
- 英文名:
pYES2-flag
- 库存:
60
- 供应商:
信裕生物
- 规格:
5ug质粒
基本信息
| 质粒类型: | 酿酒酵母表达载体 |
|---|---|
| 克隆方法: | 多克隆位点,限制性内切酶 |
订购信息
| 产品编号 | 产品名称 | 规格 | 价格 |
|---|---|---|---|
| XY1762 | pYES2-flag | 5ug质粒 |
¥1000.00 |
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文献和实验liuruya 问别人要了个带GFP-tag(GFP-N2载体)的质粒,目的基因1.4kb,分子量约52kD,转染293T细胞能见荧光,WB杂不出来,设置了阴性和阳性对照证实不是WB的技术问题。后来又换了个flag-tag,仍然杂不出来WB。仔细检查过序列,不存在移码的问题,非常费解。有同学分析是空间位阻问题,不知换个tag是不是能解决这个问题。有同学遇到过这种问题么,或者帮忙分析一下可能的原因。谢谢!!! zhuqueleee
,TaKaRa,有木有;pGM-T,天根,有木有;一些表达载体,使用最广泛的,pET 系列,Novagen 公司(默克)的;有双 MCS 的 Duet 系列载体,Novagen 的;毕赤酵母表达质粒 pPIC3.5k,pPIC9k,pPICZA,pPICZaA 等等,都是 invitrogen 的;另外一些 pYES 酿酒酵母表达系统,也是 invitrogen 的,因此知道常见的质粒是哪个公司的,去他们公司网站上肯定可以找到该质粒的相关信息。在他们公司主页搜索栏直接搜索质粒名称,得到质粒序列,图谱什么的
GFP应该位于VEGF的C端 N端会干扰其分泌信号 影响其分泌 GFP很大 很可能影响VEGF的分泌 如果只是要筛带荧光的细胞 不需要标记VEGF 建议用pIRES2-EGFP非融合载体 要是需要标记的话 可以加小分子tag 比如flag 实在需要荧光标记VEGF的话 把GFP加在C端 本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿
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