胡黄连苷Ⅱ实验步骤

鸡卵泡颗粒细胞分离、培养

1.实验动物 产蛋期母鸡（动物实验中心购买），普通饲料喂养，自由进食进饮；实验前禁食12h 2.主要试剂及仪器 EDTA-2Na购自国药集团化学试剂有限公司；双抗购自Hyclone公司；M199培养基、胎牛血清及Ⅱ型胶原酶均购自美国Gibico 公司；CO2恒温培养箱购自美国Thermo公司 3.实验步骤 A. 翅下静脉注射2mL EDTA-2Na（W/V，2%）溶液处死母鸡，新洁尔灭消毒液浸泡消毒5min，打开腹腔，剪取整个卵巢，小心剥离卵泡（以8-15g为最佳），置于装有PBS

实验时间 | 你要的细胞凋亡检测方法都在这了

是与 DNA 特异结合的活性染料，储存液用蒸馏水配成 1 mg/ml 的浓度，使用时用 PBS 稀释，终浓度为 10 ug/ml。DAPI 为半通透性，用于常规固定细胞的染色。储存液用蒸馏水配成 1 mg/ml 的浓度，使用终浓度一般为 10 ug/ml。结果评判：细胞凋亡过程中细胞核染色质的形态学改变分为三期：Ⅰ 期的细胞核呈波纹状（rippled）或呈折缝样（creased），部分染色质出现浓缩状态；Ⅱa 期细胞核的染色质高度凝聚、边缘化；Ⅱb 期的细胞核裂解为碎块，产生凋亡小体 （图 1）。透射

DNA的限制性内切酶酶切反应技术

类酶在同一蛋白质分子中兼有切割和修饰(甲基化)作用且依赖于ATP 的存在。Ⅰ类酶结合于识别位点并随机的切割识别位点不远处的DNA，而Ⅲ类酶在识别位点上切割DNA 分子,然后从底物上解离。Ⅱ类由两种酶组成: 一种为限制性内切核酸酶(限制酶),它切割某一特异的核苷酸序列; 另一种为独立的甲基化酶,它修饰同一识别序列。绝大多数Ⅱ类限制酶识别长度为4 至6个核苷酸的回文对称特异核苷酸序列(如EcoRⅠ识别六个核苷酸序列:5"- G↓AATTC-3"),有少数酶识别更长的序列或简并序列。Ⅱ类酶