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文献和实验1:5000 1:6000 1:7000 1:8000 生理盐水 ——
铵溶液,边滴加边摇匀,然后置于2到8摄氏度静置2小时。 将步骤e中的待分离物于离心机内离心,8000r/min离心15到20分钟,除上清。 将步骤f中离心后的沉淀用1ml 0.01M PBS 溶解, 转移到MD 14000透析袋内,用0.01 M PBS进行透析,透析4次以上,每次至少1小时以上。 2.正辛酸-饱和硫酸铵沉淀法该纯化方法原理是:正辛酸在偏酸条件下,能与抗血清中或者小鼠腹水中的杂蛋白结合,在等电点附近将其沉淀,IgG类抗体则存在于上清液中,再利用饱和硫酸铵沉淀法即可进一步提纯。 具体
【原创】半个多学期关于毕赤酵母的化学转化与表达的几点经验,并附上改进的简便廉价方法
), 在涡旋混合器中剧烈混匀 1 min,使细胞沉淀与加入的溶液充分混匀; (4)于 30℃孵育 30 min。再于 42℃水浴中热击 20min(20-25min)后 , 以 8 000 rpmin(6000-8000rpm)离心10min收集细胞 , (轻柔地)重悬于 200ulYPD培养基中 , 于 30℃振荡培养; (5)重悬后直接加20μL到MD板上,30℃培养 2~4 (或4~5d)d,至菌落直径1mm即可。 附2:摇瓶无机发酵,廉价简便
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