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- 2025年07月12日
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文献和实验10kDa 干扰素γ诱导蛋白（IP10）在牛生物样本中的精确检测实验
，0.625ng/mL，0.312ng/mL，0.156ng/mL，标准品稀释液 （0ng/mL） 直接作为空白孔。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。3.检测溶液 A 及检测溶液 B：Detection A 及 Detection B 在使用前请手甩几下或少时离心处理，以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。临用前分别以检测稀释液 A 或 B1:100 稀释 （如：10μL 检测溶液 A/990μL 检测稀释液 A），充分混匀，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制 （100μL/孔
分钟，倾去上清液，再以同样方法离心一次，用移液器尖头将残留的PEG溶液吸净。此时应能看到管底有芝麻大小的噬菌体颗粒沉淀。 （6）将沉淀物溶解于400ml TE缓冲液(10mmol/L Tris-HCl pH8.0，1mmol/L EDTA)。 （7）加等体积氯仿/异戊醇(24:1)混合液，强烈振荡1分钟，再以12000g离心5分钟。 （8）将水相转入一干净eppendorf管(不要触动原管中两相交界面)，加等体积酚/氯仿(1:1)混合液，强烈振荡1分钟，12000g离心5分钟
5分钟，多次重复此步骤。 （10）将上层水相转入新的eppendorf管，加0.5倍体积的7.5 mol/L 醋酸铵，2倍体积乙醇，混匀后-20℃放置 30分钟。 （11）12000g离心15分钟，去除上清液，用70％乙醇小心清洗沉淀，如果沉淀已被搅起，重新离心，倾去酒精，真空干燥沉淀物。 （12）将DNA 的沉淀物溶解于20ml去离子水中，取2ml样品进行琼脂糖凝胶电泳定量，如果DNA 量充足，则可进行退火测序。 2、噬粒(Phagemid)单链模板的制备： 噬粒是指含有丝状单链DNA
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