epTIPS LoRetention Dualfilter

DNA重组技术

效率增加３－５倍，然后降低到初始水平。 ９）用冷却的无菌吸头从每种感受态细胞悬液中各取200μl转移到无菌的微量离心管中，每管加ＤＮＡ（体积∞10μl,ＤＮＡ∞50ng），轻轻旋转以混匀内容物，在冰中放置30分钟。 10）将管放到预加温到42℃的循环水浴中放好的试管回上，恰恰放置90秒，不要摇动试管。 11）快速将管转移到冰浴中，使细胞冷却１－２分钟。 12）每管加800μlＳＯＣ培养基（见附录Ａ）。用水溶将培养基加温至37℃，然后将管转移到37℃摇床上，温育45分钟细菌复苏，并且表达

聚合酶链反应（PCR）技术的发展和应用

2+ 的浓度。 　　2．Tris -HCl缓冲液在PCR中使用10～50mmol/L的Tris HCl缓冲液，很少使用其他类型的缓冲液。Tris缓冲液是一种双极化的离子缓冲液，pKa为8.3(20℃),△pKa为0.021/℃。因此，20mmol/l Tris pH8.3(20℃)时，在典型的热循环条件下，真正的pH值在7.8～6.8之间。 　　3．KCl浓度K+ 浓度在50mmol/L 时能促进引物退火。但现在的研究表明，NaCl浓度在50mmol/L时，KCl浓度高于50mmol/L将会抑制

【经验】PCR实用技巧

不同,需要operator自己掌握适合的酶的浓度，一些高保真没的效率要远远低于Taq polymerase,所以可能需要的酶的量也要大一些. 另外, 一般的 情况下,变性的温度可以使用90~92度,变性的时间也可以缩短,从而保证polymerase的活性 d. template 50ul PCR SYSTEM ================================ human gDNA 0.1ug-1ug E.Coli 10ng-100ng LamadaDNA 0.5ng-5ng