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文献和实验除>95%的蛋白提取和样品制备过程中所使用的去垢剂,而蛋白和多肽损失极少。此树脂适用于常用去垢剂的去除,如浓度在0.5-1%的SDS、Triton X-100、NP-40和CHAPS。目前有预装的离心柱和离心板形式,最多可处理100 µL样品。另外,您也可以购买HiPPR Detergent Removal Spin Column Kit,其中包含树脂浆和空的离心柱,便于您自己调整样品体积。 整个处理过程相当简单,仅需15分钟。首先是离心去除保存液,之后用缓冲液平衡树脂并离心,重复
人 iPS 细胞体外分化为气道上皮肺类器官用于呼吸系统疾病研究应用以及iPSC操作指南
台中,使用体积设置为 10 µL的无菌 20 µL 移液器吸头从 60 mm 培养皿中6个较完整的类器官,并将其转移到 96 孔 U 型底板的 1 个孔中。 6. 将 96 孔板从解剖台转移到组织培养超净台中。 注意:为避免 ECM基质胶过早凝胶化,我们建议一次制备不超过 3 个细胞培养小室。 1. 将 60 µL 冷的 100%的减生长因子(GFR) ECM基质胶加入步骤 5 中的 96 孔板的每个孔中。通过移液器轻轻混合几次,避免产生任何气泡。 总体积 = 每孔130 µL。
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处理、洗洁精浸洗或用新的。 2. CBB子液与所加标准品和样品的量视情况适当调整,本方案所列出比例及OD值仅供参考。 3. 若样品为悬浊液,应将样本离心后取上清做蛋白定量以反应总蛋白量;或先将悬浊液碱化为溶液后再行测定(加入5-20%体积的2-5mol/L的NaOH,视情况而定)。 4. 所有样品宜在2-10min内测完。 5. 若对上样精度有把握,可以直接在酶标板内先后直接加入适量样本与测定工作液进行反应。 6.本文件取自于别人,贴出来,大家共享也请大家评论一下此法的优劣.
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