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- 百奥莱博
- 北京
- BTN120514
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
低温运输,-20℃保存
- 保质期：
两年
- 英文名：
Instant Blue-White Vector T,Type D
- 库存：
522
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格：
20次
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应即用型蓝白T载体D型(无启动子,有MCS) 克隆与表达，我公司销售全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。
即用型蓝白T载体D型(无启动子,有MCS) 克隆与表达
英文名：Instant Blue-White Vector T,Type D
产地：国产|进口
编号：BTN120514
规格：20次
品牌：百奥莱博
产品简介:
本产品是用Xcm I酶切线性化的DNA*(代"片")段,其两个末端的5"都有一个突出的T,可以用于快速克隆具有加尾活性的耐热酶(如Taq DNA聚合酶)扩增得到的PCR片段。
1.由于是通过酶切制备,所以载体两端的带T率为100%,远高于用Taq DNA聚合酶和TdT末端转移酶在平末端载体加尾得到的T载体。
2.克隆的阳性率一般在90%以上,缩短了筛选过程。
3.插入位点两侧有多克隆(CMS)位点,便于对克隆的PCR片段进行近一步的分析。
4.来源于pUC19质粒,两侧无RNA聚合酶启动子。
5.可以使用pUC/M13 Forward和Reverse测序引物测定插入片段的序列。
6.T克隆位点位于β-半乳糖苷酶的α 肽编码区内,可以进行蓝白斑筛选。
7.含有丝状噬菌体f1 复制起始子,可以制备单链DNA。
运输及保存:
低温运输,-20℃保存,有效期两年。
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文献和实验加、减、换一个载体 的MCS的位点 （给一个表达 载体加、减、换小表达标签，如His6， His10，strep II等，和MCS改造是一样的），其实技术 不是问题，问题在于位点的选择 ，因为载体设计 时应该设计者也考虑过mcs的问题，应该给使用者越多的选择越好，但为什么有的载体只给有限的几个位点呢，一可能是这个载体其他部位本身含有的限制性切点比较多，因而MCS位置的选择比较少，二就是设计者是自用的载体，没有考虑到我们的感受 。 因此如果你要加、减、换MCS，可以按一下几个步骤进行
研究某个 gene 的功能通常要做相关的功能实验，常用的手段有 gain-of-function，涉及 gene 的过表达，在下文中即将讲述；还有 loss-of-function， 通常涉及 gene 的 knock-out 或 konck-down，暂且不提。今天准备跟大家分享一下如何成功地用传统酶切酶连的方法克隆某 gene 的经验，虽然现在同源重组的方法已经越来越广泛地应用到科研中，属于 technology based innovation，给实验带来极大便利。但是传统的克隆
后都只是平端产物。这种平端克隆往往效率低，并且有非特异性背景菌落产生，造成筛选困难。Topo平端克隆主要改良载体设计，把ccdB （Control of cell death）基因并入到mcs中，如果没有DNA片断插入，ccdB基因则会表达，ccdB基因的表达蛋白，会破坏细菌的DNA gyrase，造成细菌染色体的降解导致细菌死亡。如果有插入片断，则ccdB基因表达受到阻碍，所以细胞可生长。这样可以把高背景的缺点改善，节省筛选的时间。Topo平端克隆与Topo TA方法一样，操作简单快速。Zero
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