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见标签
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2年
- 英文名:
SLS
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大量
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齐一生物
- CAS号:
137-16-6
- 规格:
25克
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文献和实验十二烷基硫酸钠―聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS ― PAGE) 第二相聚丙烯胺 胺凝胶的选择主要取决于需要分离蛋白质的相对分子质量的范围,这与单相的聚丙烯酰胺凝胶电泳的选择是相同的。当蛋白质相对分子质量在15 000~200 000时,电泳迁移率与相对分子质量的对数呈线性关系。SDS―PAGE不仅可分离蛋白质,且可在一定范围内粗略测定蛋白质的相对分子质量。其主要步骤如下。 (1)凝胶配制及灌胶:胶浓度越高,所分离蛋白质的相对分子质量范围也越大。薄的胶,其染色和脱色快,且背景
异硫氰酸胍—酚法提取RNA的原理如下:GIT与β-巯基乙醇共同作用抑制RNase的活性;GIT与 十二烷基肌氨酸钠 (Sarcosyl)作用使蛋白质变性,从而释放RNA;酸性条件下DNA极少发生解离,同蛋白质一起变性被离心下来,RNA则溶于上清中。该法所提RNA纯度高完整性好较适合纯化mRNA,逆转录及构建cDNA文库,因此为大多数人采用。与氯化铯方法比较,虽然纯度稍差一些,小分子RNA,如tRNA、snRNA不易去除,但产量高完整性好,盐易去除
实验试剂 1. Tris-Mg 缓冲液 10mM Tris-Cl 5mM MgCl2 pH 7.3,4℃保存 2. 2%(w/v)十二烷基肌氨酸钠 (SLS) 实验步骤 1. 于20ml 营养肉汤中过夜培养细菌,37℃,200rpm。 2. 10000g、20min、4℃离心,去上清。 3. 20ml预冷的Tris-Mg缓冲液重悬,同样
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