CIRBP 重组人冷诱导RNA-结合蛋白

RNA结合蛋白免疫沉淀（RIP）技术(一)

一、microRNAs（miRNA）简介 1. microRNAs（miRNA）是一种内源性非编码小分子RNA，一般具有18到25个核苷酸，其序列在进化上高度保守，通过靶向特定mRNA来调节基因的表达。 miRNA是越来越受关注的转录后调控网络（post-transcriptional control）中重要的调控因子。首先，miRNA结合到核糖核蛋白（Ribonucleoprotein，RNP）复合物中，形成RNA诱导的沉默复合体（RNA-induced silencing

RIP技术（RNA结合蛋白免疫沉淀）

RIP技术（RNA Binding Protein Immunoprecipitation，RNA结合蛋白免疫沉淀），是研究细胞内RNA与蛋白结合情况的技术，是了解转录后调控网络动态过程的有力工具，能帮助我们发现miRNA的调节靶点。RIP这种新兴的技术运用针对目标蛋白的抗体把相应的RNA-蛋白复合物沉淀下来，然后经过分离纯化就可以对结合在复合物上的RNA进行分析。RIP可以看成是普遍使用的染色质免疫沉淀ChIP技术的类似应用，但由于研究对象是RNA-蛋白复合物而不是DNA-蛋白复合物，RIP

RNA结合蛋白免疫沉淀（RIP）技术(二)

质或RNA来实现的，因此研究miRNA与蛋白的结合情况对于揭示miRNA的功能及指导RNA疗法的研发具有重要意义。Robert Nakamura博士是Advanced Genetic Systems公司的首席执行官，作为验证RNA-蛋白复合物作为治疗靶点有效性的专家，他认为“我们知道RNA结合蛋白在不同的生理状态下会结合不同的RNA。通过从细胞中分离完整的RNA-蛋白复合物，我们可以确认分子间的特异性相互作用，从而有希望为治疗疾病找到破坏这些相互作用的方法。” RIP技术（RNA Binding