- ￥6000
- 赫澎生物
- 上海
- HPBIO-JM1251
- 2025年11月09日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
干燥密封保存
- 供应商：
赫澎（上海）生物
- 规格：
20次
产品内容
HEPNGBIO缓冲液（Reagent A） 毫升
HEPNGBIO阴性液（Reagent B） 毫升
HEPNGBIO底物液（Reagent C） 微升
HEPNGBIO活化液（Reagent D） 微升
产品说明书 1份
保存方式
保存在-20℃冰箱里；HEPNGBIO底物液（Reagent C）避免光照和反复冻融；HEPNGBIO活化液（Reagent D）具有毒性，注意操作安全；
用户自备
1.5毫升离心管：用于样品制备和储存的容器
微型台式离心机：用于样品沉淀
培养箱：用于反应物孵育
酶标板或比色皿：用于样品比色测定的容器
酶标仪或分光光度仪：用于样品比色分析
实验步骤
- 样品制备
- 准备好ACD抗凝管（注意：避免使用EDTA和肝素抗凝管）
- 抽取1毫升血液，置于抗凝管里
- 放进4℃微型台式离心机离心10分钟，速度为700g（或3000RPM，例如eppendorf 5415）
- 小心移取上层黄色液体到新的1.5毫升离心管――此为血浆成分（注意：避免触碰白色液体层）
- （选择步骤）移取10微升进行蛋白定量检测（注意：建议使用HEPNGBIO Bradford蛋白质浓度定量试剂盒－HEPNGBIO30030.1）
- 即刻置于冰槽里备用或放进－70℃冰箱里保存
- 测定准备
-
- 准备好上述制备的待测样品
- 设定好酶标仪（温度为37℃）：波长405nm，并置零
- 实验开始前，将－20℃冰箱里的试剂盒中的HEPNGBIO底物液（Reagent C）置入冰槽里融化，避免光照。HEPNGBIO缓冲液（Reagent A）室温下均衡温度
-
- 活化因子X（FXa）测定
- 在96孔酶标板上做好相应标记：背景对照和样品
- 分别移取xx微升HEPNGBIO缓冲液（Reagent A）到相应孔中
- 分别加入xx微升HEPNGBIO阴性液（Reagent B）或上述制备的待测样品（50微克蛋白）到相应孔中（注意：样品须清澈）
- 分别加入xx微升HEPNGBIO底物液（Reagent C）
- 轻轻摇动96孔酶标板（注意：避免气泡）
- 在37℃温度下孵育60分钟（注意：可见反应孔里呈现肉眼可见的黄色）
- 即刻放进酶标仪检测或转移到100微升比色皿，在分光光度仪里检测
- 活性计算：
-
- 酶标仪检测
-
- 比色皿检测
-
- 凝血因子X（FX）测定
检测开始前，移取xx微升HEPNGBIO缓冲液（Reagent A）到1.5毫升离心管，分别加入xx微升HEPNGBIO活化液（Reagent D）和待测样品（注意：50微克蛋白），混匀后，放进30℃培养箱里孵育5分钟。然后继续下列操作。
-
-
- 在96孔酶标板上做好相应标记：背景对照和样品
- 分别移取xx微升HEPNGBIO缓冲液（Reagent A）到所有孔里
- 加入xx微升HEPNGBIO阴性液（Reagent B）到背景对照孔里
- 加入20微升上述制备的待测样品到样品孔里
- 分别加入xx微升HEPNGBIO底物液（Reagent C）
- 轻轻摇动96孔酶标板（注意：避免气泡）
- 在37℃温度下孵育60分钟（注意：可见反应孔里呈现肉眼可见的黄色）
- 即刻放进酶标仪检测或转移到100微升比色皿，在分光光度仪里检测
- 活性计算：
-
-
- 酶标仪检测
-
- 比色皿检测
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文献和实验蛋白。除此，还可测定下列参数：(1)凝血因子分析（Ⅱ、Ⅴ、Ⅹ、Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ）；(2)α-2-抗胞浆素；(3)肝素抗-Xa；(4)蛋白C及活性蛋白C；(5)狼疮抗凝物；(6)蛋白C和S抗凝物等等。 当病人发生DIC、原发性纤溶症、维生素K缺乏症、肝脏疾病或血液循环中有抗凝物质时，凝血酶原时间(PT)都会延长；若PT缩短则常见于凝血因子V增多症、高凝状态和血栓性疾病等。当病人有肝脏疾病、阻塞性黄疸、新生儿出血症、肠道灭菌综合征、吸收不良综合征等某种疾病时，活化部分凝血酶时间（APTT）会延长；APTT
的筛检试验，但因其操作标准化程度不高，敏感性不好，且无法反映凝血因子的含量及活性，故目前已为凝血功能检查所取代。凝血功能检查主要包括血浆凝血酶原时间(PT)及由PT计算得到的PT活动度、国际标准化比值(INR)，纤维蛋白原(FIB)，活化部分凝血活酶时间(APTT)和血浆凝血酶时间(TT)。 PT主要是反映外源性凝血系统功能。PT延长主要见于先天性凝血因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ减少及纤维蛋白原缺乏、获得性凝血因子缺乏(DIC、原发性纤溶亢进、阻塞性黄疸、维生素K缺乏、血循环中抗凝物质增多
化作用——氧分子、过氧化氢、氧自由基 5. 表面活性剂和去污剂 6.变性剂——脲和盐酸胍、高浓度盐、螯合、有机溶剂 7. 重金属离子和巯基试剂 8. 热 9. 机械力 10. 冷冻和脱水 11. 辐射 5. 酶活计算 ① 酶活定义 酶的活力单位：酶的1个活力单位是在该酶的最适条件下，在25℃、1 min内催 1μmol的底物转化为产物的酶量。 ② 定时法的计算 将酶与底物在特定条件下孵育，酶促反应开始进行，经过一定时间后，用终止液终止反应，通过化学或生物化学的方法测出底物或产物的总变化量，除以时间即可
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