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赫澎(上海)生物
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文献和实验(7)式或(9)式可计算叶绿素总量。 叶绿体色素的提取液中除含有叶绿素a与b外,还含有叶黄素和胡萝卜素,因为叶黄素和胡萝卜素的吸收光谱均在蓝光区,故不会干扰叶绿素含量在红光区的分光光度法测定。 器材与试剂 722分光光度计,叶绿体色素提取所需器材。 方法与步骤 1. 提取叶绿素。 2. 测定光密度。 在1cm比色杯中,注入叶绿素提取液(浓度大时需稀释)。另以叶绿素提取介质作为参比溶液注入同样的比色杯中。根据实验要求,选用相应的波长(测总量选用652nm,测叶绿素a、b含量
吸收峰。据此所测得的吸光度值代人不同的经验公式(见结果计算),计算出叶绿体色素丙酮(或乙醇)提取液中叶绿素 a 和 b 的浓度及其叶绿素总浓度和类胡萝卜素的总浓度,并依据所使用的单位植物组织(鲜重、干重或面积),求算出色素的含量。 [ 实验目的 ] 掌握分光光度法对植物叶绿体色素提取液中叶绿素 a 和 b 的浓度及其叶绿素总浓度和类胡萝卜素的总浓度测定与计算方法,以及植物材料中各种色素含量的求算方法。 [ 器材和试剂 ] 1 .植物材料 新鲜(或烘干)植物叶片,如菠菜叶片等。 2 .实验
、45.6为叶绿素a、b在波长645nm时的比吸收系数。解方程式(1)(2),则得:此时,CT为总叶绿素浓度,CA 、CB为叶绿素a、b的浓度,单位为每升毫克,利用上面(3)(4)(5)式,即可以计算a、b总叶绿素的浓度。二、仪器药品 扭力天平 剪刀 研钵 移液管 漏斗 大试管 丙酮 碳酸钙 石英砂 721型分光光度计(如有其他精密型号的分光光度计则更好)三、实验步骤 1、提取叶绿素从植株上选取有代表性的叶片数张,于扭力天平上称取0.1g鲜重,剪碎后置于研钵中,加蒸馏水5-6ml,碳酸钙少许及适量
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