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文献和实验; 2)DNM T3a、DNM T3b从头甲基转移酶, 它们可甲基化CPG, 使其半甲基化, 继而全甲基化。从头甲基转移酶可能参与细胞生长分化调控, 其中DNM T3b在肿瘤基因甲基化中起重要作用。三、 相关图解四、 DNMT的抑制剂Decitabine:Decitabine是一种DNA甲基化的有效抑制剂,作用于HL-60和KG1a细胞时,IC50分别为100 ng/mL和1 ng/mL。Lomeguatrib:Lomeguatrib是一种有效的O6-alkylguanine-DNA
定OD值,可向每孔中加入10 μL 0.1 M HCl溶液或者1%(W/V)SDS溶液,并遮盖培养板避光室温保存。在24小时内吸光度不会发生变化。 7.结果分析: A.细胞存活率:将各测试孔的OD值减去本底OD值(空白组),各重复孔的OD值取平均数±SD。 细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100%。 B.求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)。 五、经验总结 1.种板数:通过文献确认,看实验所用细胞别人是否做过,找出大致范围
。这样,才能保证MTT结晶形成酌量与细胞数呈的线性关系。否则细胞数太多敏感性降低,太少观察不到差异。2.药物浓度的设定。一定要多看文献,参考别人的结果再定个比较大的范围先初筛。根据自己初筛的结果缩小浓度和时间范围再细筛。切记!否则,可能你用的时间和浓度根本不是药物的有效浓度和时间。3. 时间点的设定。在不同时间点的测定OD值,输入excel表,最后得到不同时间点的抑制率变化情况,画出变化的曲线,曲线什么时候变得平坦了(到了平台期)那个时间点应该就是最好的时间点(因为这个时候的细胞增殖抑制表现的最明显
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