SP-420是desferrithiocin类似物，比des

在大肠杆菌中高效表达外源蛋白的策略

[20]和组成发卡结构的保护性元件，阻止核酸外切酶对mRNA的降解，从而延长mRNA的半衰期[21]。 除了上述对基因表达的效率有直接影响的元件以外，载体还含有抗生素抗性基因，以方便质粒的筛选和传代。氨苄青霉素是最常用的抗性标记。但在生产人用治疗性蛋白时，最好选择其他抗性标记(如Tet)以避免可能发生的过敏反应[22]。质粒的拷贝数由复制起点决定。 在特殊情况下，选用失控复制子能够获得大量的质粒拷贝数和较高产量的质粒编码蛋白[23，24]。但在另外一些情况下，选用超过pBR

RNA介导的基因沉默

1 : 在细菌中通过“空白”区域将自我互补的区域隔开，获得稳定的反向重复序列。如果间隔序列编码内含子，基因沉默效率会非常高，确保由目的基因构建的转化子可以 100% 地引起不同程度的基因沉默[12]。 注 2 : BSMV 是大麦病毒家族的典型成员，它是正义单链 RNA 病毒，由 α、β 和 γRNA 组成三元基因组。选择植物中需要被沉默的目的基因的转录序列片段插入到 DNA 质粒中，可以通过体外转录合成 γRNA。植物 cDNA片段被克隆到 γb 可读框终止子的下游（图 12.2)。 注

【资源】蛋白纯化经验指南（）

binding，我还没有试过。 您有这方面的经验么？多谢了 1,其实反相价格会更好点,因为有机器,柱子和流动相也不便宜,其实我们用的是国产的GST融合蛋白的纯化系统,价格就不贵,你PM你的邮件给我,我给你一份材料,反相柱子其实做不了多少东西,所以建议你别用它制备. 2.只要你有标准蛋白,那用HPLC做分析代替电泳是很不错的,因为这样时间缩短了,效率更高,而且定量很准确. 3.三氟乙醇我的看法是降低了极性,这样你的蛋白不会因为(环境极性大)疏水相互作用太强和聚集,至于活性那你多查文献看有