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北京百奥莱博专业生产供应北京双荧光素酶报告基因检测试剂盒价格厂家,我公司销售全品类的细胞生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
产地:国产|进口
英文名:Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit
品牌:百奥莱博
编号:KFS303
双萤光素酶报告基因检测试剂盒,是先以萤光素(luciferin)为底物来检测萤火虫萤光素酶(Firefly luciferase),后以肠腔素(coelenterazine)为底物来检测海肾萤光素酶(Renilla luciferase),并且在后续加入海肾萤光素酶底物时,同时加入抑制萤火虫荧光素酶催化luciferin 发光的物质,使后续检测仅仅检测到海肾萤光素酶的活性,实现双萤光素酶报告基因检测。萤火虫萤光素酶是一种分子量约为61kD 的蛋白,在ATP、镁离子和氧气存在的条件下,可以催化luciferin 氧化成oxyluciferin,在luciferin 氧化的过程中,会发出生物萤光(bioluminescence)。海肾萤光素酶是一种分子量约为36kD 的蛋白,在氧气存在的条件下,可以催化coelenterazine 氧化成coelenteramide,在coelenterazine 氧化的过程中也会发出生物萤光。生物萤光可以通过化学发光仪(luminometer)或液闪测定仪进行测定。
注意事项
1.无菌操作。
2.荧光染料操作中注意避光进行。
3.由于温度对酶反应有影响,所以测定时样品和试剂均需达到室温后再进行测定。
4.为保证荧光素酶检测试剂的稳定性,可以采取适当分装后避光保存的方法,以避免反复冻融和长时间暴露于室温。
5.萤火虫荧光素酶检测试剂、Renilla 荧光素酶检测试剂最好现用现配。
6.细胞裂解液及裂解时间可根据细胞量适当增加、延长。
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·细胞质标记染料,长效示踪CDCFDA,SE
编号:KFS156
英文名称:5-(and-6)-Carboxy-2’,7’-dichlorofluorescein diacetate, succinimidyl ester
规格:10mg
活细胞荧光示踪探针CDCFDA, SE已被广泛证实,用CDCFDA 活细胞绿色荧光探针标记细胞能有效确定总细胞的数量和一个样本中存在多少活细胞。流式细胞术结合荧光染色法是分析非均质细胞种群的有力工具。
FDA 和它的衍生物无荧光分子进入细胞后被胞内无特异性的酯酶所水解产生荧光。这些荧光产物只能积聚在具有完整细胞膜的细胞中。因此,死细胞无完整细胞膜不能被染色。FDA 具备精确地膜转运动力学和胞内水解作用或者类似物(CDCFDA)相关的细胞功能,因此可以通过荧光显微镜或者流式细胞仪来检测FDA 标记的细胞。过FDA 荧光标记的细胞在细胞系或者菌株中存在变化,可能是由于不同胞内酯酶的活性所造成的。活细胞荧光示踪探针CDCFDA, 琥珀酰亚胺酯是一个胺化FDA 衍生物,可以用来制备各种FDA偶联物。
·Annexin V-APC/PI双染双染细胞凋亡检测试剂盒
编号:KFS191
英文名称:Annexin V-APC/PI Apoptosis Detection Kit
规格:20T|100T|50T
在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸(PS)只分布在细胞膜脂质双层的内侧,而在细胞凋亡早期,细胞膜中的磷脂酰丝氨酸(PS)由脂膜内侧翻向外侧。Annexin V 是一种分子量为35~36kD 的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力,故可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。因此Annexin V 被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。将Annexin V 进行荧光素APC 标记,以标记了的Annexin V 作为荧光探针,利用荧光显微镜或流式细胞仪可检测细胞凋亡的发生。
碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)是一种核酸染料,它不能透过完整的细胞膜,但对凋亡中晚期的细胞和死细胞,PI 能够透过细胞膜而使细胞核染红。因此将Annexin V- APC 与PI 匹配使用,就可以将处于不同凋亡时期的细胞区分开来。
本试剂盒可应用于培养细胞凋亡检测(不推荐用于检测组织样本)。
注意事项
1. 微量试剂取用前请离心集液。
2. Annexin V-APC/PI 避光保存及使用。
3. PI 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
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·羟脯氨酸测试盒(消化法)(测培养细胞、培养液)(Hyp)
编号:KFS370
规格:48T
羟脯氨酸在氧化剂的作用下所产生的氧化产物与二甲氨基苯甲醛作用呈现紫红色,根据其呈色的深浅可推算出其含量。
·kFluor555标记山羊抗小鼠IgG(H+L)
编号:KFS404
英文名称:KeyFluor555 Goat anti-mouse IgG(H+L)
规格:100μL
浓度:2.0mg/ml
储存:4℃避光,有效期6个月(或-20℃避光,有效期一年)
荧光标记的山羊抗小鼠免疫球蛋白抗体能被荧光显微镜,激光扫描共聚焦显微镜,流式细胞术,荧光吸光检测器检测出。我们所给出的荧光标记宽度使我们的试剂几乎能适用于任何荧光检测机器。
山羊抗小鼠免疫球蛋白抗体是为了能和所有小鼠免疫球蛋白重链和轻链起反应的同类纯化抗体准备的。为了把交叉反应的影响降到最低,相比于其他抗体,山羊抗小鼠免疫球蛋白抗体应优先选择从小鼠免疫球蛋白和血清中提取。标记每个聚合物的标准是每一个免疫球蛋白分子用2-8个荧光团或生物素分子标记。在准备阶段,必须检测样品中有没有非结合的染料,并且把样品在无荧光实验中做检测以确保较低的非特异性染色的可能。
使用说明
1. 在使用前,用微型离心机短暂地分离蛋白质溶液,留取上清液进行实验。这一步除除去了储存中可能形成的蛋白质聚合物,因此减少了非特异性背景染色的可能。
2. 因为在不同的应用条件,染色方法是不同的,所以应该根据经验需要稀释适量的抗体。
3. 对于荧光团和生物素标记抗体, 1-10μg/mL 的终浓度应该适用于大部分的免疫组织化学应用。
4. 对于流式细胞术,1×106个细胞才能等到令人满意的结果。
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