KFS300型Rapamycin(FRAP/mTOR抑制剂)

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KFS300型Rapamycin(FRAP/mTOR抑制剂)大量库存促销
编号：KFS300
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
规格：100 μg
Rapamycin (Sirolimus)是一种选择性的mTOR 抑制剂，IC50为~0.1 nM。

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·5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(25%甘油)
编号：KFS080
英文名称：5×SDS-PAGE loading buffer(With 25% Glycerol)
规格：1ml
本产品作为蛋白质电泳Loading Buffer，适用于变性聚丙烯酰胺凝胶电泳时的蛋白样品制备和上样。蛋白上样缓冲液(SDS-PAGE loading buffer)是一种以溴酚蓝为染料，5倍浓缩的SDS-PAGE 凝胶电泳上样缓冲液，用于常规的SDS-PAGE蛋白电泳样品上样。

操作步骤
1. 按每4 微升蛋白样品加入1 微升5×SDS-PAGE 蛋白上样缓冲液的比例，混合蛋白样品和蛋白上样缓冲液(5X)。
2. 100℃或沸水浴加热5 分钟，以充分变性蛋白。
3. 置冰上5 分钟，10000rpm 离心1 分钟，取上清直接上样到SDS-PAGE 胶加样孔内即可。

储存：2～8℃，有效期12个月。

·CFDA,SE细胞增殖与示踪检测试剂盒
编号：KFS321
英文名称：CFSE Cell Proliferation and Tracking Kit
规格：1000T
CFSE细胞增殖与示踪检测试剂盒是基于一种新型荧光探针CFDA SE的用于细胞增殖检测和细胞荧光示踪的检测试剂盒。CFDA SE目前被广泛用于替代MTT法或[3H]-thymidine掺入等其它细胞增殖检测方法。

基于CFDA SE荧光标记的细胞增殖检测和[3H]-thymidine掺入、BrdU标记获得的检测结果完全一致，但同时可以提供更多的细胞增殖信息。使用CFDA SE检测可以提供整个细胞群中有多少比例的细胞分裂了1次、2次或更多次数，同时如果和其它荧光探针联用，可以获取不同分裂次数细胞的其它相关信息。

CFDA SE 的全称为Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester，分子式为C29H19NO11，分子量为557.47。CFDA SE可以通透细胞膜，进入细胞后可以被细胞内的酯酶(esterase)催化分解成CFSE，CFSE可以偶发性地(spontaneously)并不可逆地和细胞内蛋白的Lysine残基或其它氨基发生结合反应，并标记这些蛋白。在加入荧光探针CFDA SE后大约24小时，即可充分标记细胞。被CFDA SE标记的非分裂细胞的荧光非常稳定，稳定标记的时间可达数个月。CFSE标记细胞的荧光非常均一，比以前使用的其它细胞示踪荧光探针例如PKH26的荧光更加均一，并且分裂后的子代细胞的荧光分配也更均匀。

由于CFDA SE标记细胞的荧光非常均匀和稳定，每分裂一次子代细胞的荧光会减弱一半，这样通过流式细胞仪检测就可以检测出没有分裂的细胞，分裂一次的细胞(1/2的荧光强度)，分离两次的细胞(1/4的荧光强度)，分裂三次的细胞(1/8的荧光强度)以及类似的其它分裂次数的细胞。

CFDA SE标记细胞后通常用流式细胞仪进行细胞增殖检测。最常用于淋巴细胞的增殖检测，也可以用于成纤维细胞、NK细胞等其它细胞的增殖检测，甚至还可以用于细菌增殖的检测。

注意事项
1. CFDA SE配制成储存液后宜在一个月内使用完毕，最长不宜超过2个月。CFDA SE易被水解，在水溶液中会很快变质。请在使用过程中避免接触水。在标记细胞的过程中和水接触是在许可的范围内的。
2. CFDA SE溶剂在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内，可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。
3. 荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。4.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。


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·1×WB洗涤液(PBS)
编号：KFS069
英文名称：Western Blot Wash Buffer(1×) in PBS
规格：250ml
WB洗涤液可以用于Western Blot时一抗或二抗孵育后的洗涤。适当的洗涤可降低背景，增强信噪比。

一抗或二抗孵育结束后，加入适量的1×WB 洗涤液，使之能盖住杂交膜，在摇床上缓慢摇动洗涤10-15 分钟后，吸尽洗涤液，再加入新的WB洗涤液。共洗涤3 次，每次10-15 分钟。然后进行后续的操作。

如果按照上述洗涤条件,WB的染色结果背景仍然较高，可以适当延长洗涤时间，并增加洗涤次数。通常，延长洗涤时间或增加洗涤次数不会对WB的结果产生负面影响。

注意事项
1. WB 洗涤液经过滤除菌处理，使用过程中应尽量避免细菌污染。
2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

·线粒体细胞核转位分析试剂盒(HCS法)
编号：KFS104
英文名称：Western Blot Wash Buffer(1×) in PBS
规格：100T
小牛胸腺提取的组蛋白H1，以Alexa Fluor488 标记富含赖氨酸的组蛋白H1。在体外细胞实验中可以通过搭配相应的蛋白转染步骤，将Alexa Fluor488 标记的组蛋白H1 结合物导入细胞中，从而跟踪研究组蛋白H1 在细胞内的运输与定位。

具有细胞膜渗透性的MitoRed 探针包含一个温和的巯基反应性氯甲基基团，可用于标记线粒体，并在固定之后保留在线粒体内。标记线粒体，细胞可以与MitoRed 探针简单孵育，探针通过被动扩散传过质膜，并在有活性的线粒体内富集。

细胞核荧光染料Hoechst 33258 是一种无毒、水溶性双苯咪唑类化合物，具有很好的膜透性，可作为荧光探针与DNA 分子结合。

储存：4℃避光，有效期12个月。


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·U0126(MEK1/2抑制剂)
编号：KFS282
英文名称：U0126
规格：1mg

CAS：1173097-76-1
分子式：C18H16N6S2.C2H6O
分子量：426.56
储存：-20℃，有效期36个月
别名：UO126 EtOH
化学名：(2Z,3Z)-2,3-bis(amino(2-aminophenylthio)methylene)succinonitrile,ethanol

·XTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂
编号：KFS317
英文名称：XTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Kit
规格：500T|1000T
XTT(二甲氧唑黄)是一种类似于MTT 的化合物，在电子耦合试剂存在的情况下，活细胞线粒体中存在与辅酶Ⅱ相关的脱氢酶，可将黄色的XTT 还原成水溶性的橘黄色的甲臜。生成的甲月赞能够溶解在组织培养基中，不形成颗粒，可直接用酶联免疫检测仪检测定吸光值。

注意事项
1. 本试剂盒的检测依赖于脱氢酶催化的反应，如果待检测体系中存在较多的还原剂，例如一些抗氧化剂会干扰检测，需设法去除。
2. 如果待测溶液有还原性，测定不含细胞，但含有XTT 的待测溶液在450 nm 处的空白吸光度。如果该吸光度很小，则可以直接加入XTT，如果吸光度相对较大，则需要除去培养基，并用培养基洗涤细胞两次，然后加入新的100 μl 培养基和50 μl XTT 工作液进行检测。
3. 用酶标仪检测前请确保孔内没有气泡，否则会干扰测定。
4. 为保证您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

操作方法
1. 96 孔板加入细胞100μL/孔（约1×104），置37℃ 5%CO2 细胞培养箱培养24 小时。2.加入适当浓度的受试化合物。3.将96 孔板在37℃，含5% CO2 空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4. 向各孔中加入50 μl 的XTT 检测工作液。
5. 37℃下孵育1~4 小时。
6. 酶标仪在450nm 波长处检测每孔的光密度。

结果分析
1. 细胞的存活率：将各测试孔的OD 值减去本底OD 值（完全培养基加XTT 工作液，无细胞）或空白药物孔OD 值（完全培养基加受试药物的不同稀释度加XTT 工作液，无细胞），各重复孔的OD 值取均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示，T 为加药细胞的OD 值，C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =（加药细胞OD/对照细胞OD）×100
2. 求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)。

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