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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
6-12months
- 英文名:
Recombinant Interleukin 9 Receptor (IL9R)
- 库存:
大量
- 供应商:
泽叶生物
- 规格:
50ug/100ug/1mg
上海泽叶生物科技有限公司是一家集研发、生产和销售于一体的生命科学实验室产品创新性高科技企业。主要从事免疫学,重组蛋白,细胞因子,抗原/多肽/蛋白等产品主要包括免疫调节蛋白、白细胞介素、CSFs、生长因子、干扰素、Chemokines 、Adipokines 、TGFß / BMP Proteins、神经因子、FGFs和TNF配体/受体防御因子等。并代理销售Amresco,qiagen Millipore,eBioscience,Sigma,SANTA,Sciencell,R&D、GBD、ATCC、HYCLONE, CELLutions Biosystems INC , Neuromics , Chemicon, Equitech-bio, Biovision, Promega, Kamiya, Prospec, Cytoskeleton, Novagen, SurModics, Cytelligen LONZA等二十多家国外知名品牌,致力于为广大高校、科研院所和企事业单位提供一流的科研试剂和完善的技术服务。
经甲醛固定的部分组织细胞,因固定过程中可能会形成醛键或羧甲基而封闭部分抗原决定簇,使免疫组化标记敏感性明显降低,因此在染色前,有些抗原需进行修复或暴露。
抗原修复方法可分为化学方法和物理方法。化学方法是以酶消化方法,常用胰蛋白酶及胃蛋白酶,配制浓度与消化时间要适度。常用的物理方法有单纯加热、微波处理和高压加热。在选用这三种方法时,浸泡切片的缓冲液的离子强度和pH、加热的温度和时间均影响着抗原修复效果。
1、pH的应用范围及选择
抗原修复液的pH非常重要,有效的抗原修复pH要比修复液的化学成分更重要,同样的修复液随着pH的升高染色的强度逐渐增强,但最佳pH范围为6.0-10.0。目前大家公认的最好的抗原修复液是pH6.0的柠檬酸盐缓冲液和pH8.0的EDTA缓冲液。作为通用修复液碱性pH的修复液要比酸性的有效,而对固定很长时间旧的存档组织,酸性pH的修复液则优于碱性的修复液。
2、抗原修复时应选择最佳温度
70-90℃的温度对未经固定的蛋白质可发生变性,但经福尔马林固定的蛋白质,温度必须达到92℃以上方能使其变性。研究结果显示,温度为92-98℃是合适的,95℃效果最好。
3、抗原修复液必须遵循自然降温规律,否则效果不好或达不到抗原修复的目的
抗原修复持续时间过后,取出放于室温中让其慢慢地降温,绝对不能为了争取时间,强行用冰块或冷水使其降温。这是因为当高温中的抗原蛋白分子链脱离了其他的束缚或联结,要有一个自然环境让其自然放松下来,随着温度的降低,它们会慢慢地恢复原来的形态和构型。
4、尽量使用足量的抗原修复液
应用于抗原修复的液体,一定要充足,防止切片干涸。应用大量的抗原修复液时,由于它的量较大,可延缓液体的沸腾时间,增加切片受微波辐射的量,对抗原修复将达到彻底。
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文献和实验,几种不同的α链(结合链)可以起用结构相同的信号转导链。以IL2R为例,这是由三条多肽链结合在一起的复合体,其中IL2R。链属低亲和力结合链,由两个Ig样结构域组成(因而属于下面要提到的免疫球蛋白受体家族),胞内段很短,不能传递信号,需经诱导后才能表达在激活的T细胞表面。属于组成性表达的IL-2Rp和丁链为CkR―F成员,胞膜外区各有一个Ck结构域和FN3结构域。三链共同构成高亲和力的IL2R,由p链和丁链参与信号转导。IL-4R、IL7R、IL9R和IDl5R的丁链结构和功能相似。
吴佰霖 老板的一个课题,一个分泌性蛋白,可结合一些小分子,与膜上受体结合,但是用重组表达的蛋白与 pcDNA过表达这个蛋白的生物学效果不一样 请问有什么研究策略吗 freecell 你的研究材料? 研究目的? 吴佰霖 材料:细胞系,酵母表达重组蛋白,pcDNA表达克隆载体, 研究目的是分泌性蛋白结合受体后在胞内的信号通路,或相关作用分子
,建议选择 OD 值落在标曲范围中部的稀释倍数为最佳稀释倍数。 2 回收率 评估试剂盒测量结果趋于真实值程度的指标。一般添加标准品(重组蛋白)到天然样本基质内,进行测定。通常,线性及回收率的范围在 80%-120% 比较合适。 3 天然样本检测 确保试剂盒可以检测天然样本及合适的样本类型。可根据靶蛋白性质对天然样本进行选择,例如:血清、血浆、细胞上清、尿液、唾液和乳汁等。 4 交叉反应 通过交叉反应评估试剂盒的特异性。交叉反应越小,说明试剂盒的特异性越好。 ✔与同家族其他蛋白或结构类似物的交叉
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