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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
6-12months
- 英文名:
Recombinant Lin-28 Homolog A (LIN28A)
- 库存:
大量
- 供应商:
泽叶生物
- 规格:
50ug/100ug/1mg
上海泽叶生物科技有限公司是一家集研发、生产和销售于一体的生命科学实验室产品创新性高科技企业。主要从事免疫学,重组蛋白,细胞因子,抗原/多肽/蛋白等产品主要包括免疫调节蛋白、白细胞介素、CSFs、生长因子、干扰素、Chemokines 、Adipokines 、TGFß / BMP Proteins、神经因子、FGFs和TNF配体/受体防御因子等。并代理销售Amresco,qiagen Millipore,eBioscience,Sigma,SANTA,Sciencell,R&D、GBD、ATCC、HYCLONE, CELLutions Biosystems INC , Neuromics , Chemicon, Equitech-bio, Biovision, Promega, Kamiya, Prospec, Cytoskeleton, Novagen, SurModics, Cytelligen LONZA等二十多家国外知名品牌,致力于为广大高校、科研院所和企事业单位提供一流的科研试剂和完善的技术服务。
经甲醛固定的部分组织细胞,因固定过程中可能会形成醛键或羧甲基而封闭部分抗原决定簇,使免疫组化标记敏感性明显降低,因此在染色前,有些抗原需进行修复或暴露。
抗原修复方法可分为化学方法和物理方法。化学方法是以酶消化方法,常用胰蛋白酶及胃蛋白酶,配制浓度与消化时间要适度。常用的物理方法有单纯加热、微波处理和高压加热。在选用这三种方法时,浸泡切片的缓冲液的离子强度和pH、加热的温度和时间均影响着抗原修复效果。
1、pH的应用范围及选择
抗原修复液的pH非常重要,有效的抗原修复pH要比修复液的化学成分更重要,同样的修复液随着pH的升高染色的强度逐渐增强,但最佳pH范围为6.0-10.0。目前大家公认的最好的抗原修复液是pH6.0的柠檬酸盐缓冲液和pH8.0的EDTA缓冲液。作为通用修复液碱性pH的修复液要比酸性的有效,而对固定很长时间旧的存档组织,酸性pH的修复液则优于碱性的修复液。
2、抗原修复时应选择最佳温度
70-90℃的温度对未经固定的蛋白质可发生变性,但经福尔马林固定的蛋白质,温度必须达到92℃以上方能使其变性。研究结果显示,温度为92-98℃是合适的,95℃效果最好。
3、抗原修复液必须遵循自然降温规律,否则效果不好或达不到抗原修复的目的
抗原修复持续时间过后,取出放于室温中让其慢慢地降温,绝对不能为了争取时间,强行用冰块或冷水使其降温。这是因为当高温中的抗原蛋白分子链脱离了其他的束缚或联结,要有一个自然环境让其自然放松下来,随着温度的降低,它们会慢慢地恢复原来的形态和构型。
4、尽量使用足量的抗原修复液
应用于抗原修复的液体,一定要充足,防止切片干涸。应用大量的抗原修复液时,由于它的量较大,可延缓液体的沸腾时间,增加切片受微波辐射的量,对抗原修复将达到彻底。
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文献和实验Nat Cell Biol:施威扬 / 鲍志戎组合作绘制人类胚胎器官发生时期单细胞图谱
转化可能由异时性基因 LIN28A 介导。第二,通过与妊娠二期的人胚数据整合,指出目前胚胎期数据仍较稀疏而阻碍了完整轨迹的构建。 总结来说,该研究深度刻画了人胚器官发生时期的细胞类型,为理解进化过程、寻找出生缺陷因素提供了线索,也为人体器官的体外诱导提供了有效的参考系。 中国海洋大学施威扬教授和美国纪念斯隆凯特琳癌症研究所鲍志戎教授为本文的共同通讯作者,美国纪念斯隆凯特琳癌症研究所徐一驰博士和同济大学张腾娇博士为共同第一作者,该工作受昆山中医院王丽慧医生的大力支持。
Sci Adv: 打开重编程「黑箱」,这个团队发现关键因子,提高多能干细胞诱导效率
Advances所以,作者使用了 OSKM 经典方法对人源成纤维细胞进行了重编程诱导,再通过基于微流控芯片系统的分离技术,对 33468 个细胞进行了两种单细胞测序,并建立了测序文库。通过该方法获得的测序数据表明,重编程失败的细胞依旧表达高水平的间充质细胞与体细胞标记物 ZEB1 和 COL1A1,而重编程成功的细胞显示出了高水平的 EPCAM ,NANOG 与 LIN28A 表达。这些数据证明通过微流控芯片分离出单细胞能够得到高质量的测序结果。 在获取到高质量的数据后,作者进行了参考成分
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发信人: royluo ( 罗马情结), 信区: Biology 标 题: 从纯化到星辰---CSH蛋白质纯化课侧记(一) 发信站: Unknown Space - 未名空间 (Thu Apr 28 14:37:18 2005) WWW-POST 本文献给YL 引子 2000年5月6日,我一个人在合肥三孝口书店闲诳,希望买点参考书带出国去。我注意到有 一本翻译过来的书, 书名叫做《蛋白质纯化与鉴定实验指南》。这本书很奇怪,里面列出了很多具体实验的步 骤和解
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