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EASYspin Plus 植物RNA快速提取试剂盒

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  • ¥910
  • 艾德莱/aidlab
  • 国产
  • RN3802
  • 2025年12月29日
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      EASYspin Plus Plant RNA Kit EASYspin Plus

    • 库存

      充足

    • 供应商

      杭州昊鑫生物科技股份有限公司

    • 规格

      50次

    EASYspin Plus 植物RNA快速提取试剂盒

    目录号: RN38

    产品介绍

         本公司独家推出EASYspin无Phenol、氯仿RNA快速提取技术基础上,又独家研发成功基因组DNA清除柱技术可以有效清除gDNA残留,得到的RNA一般不需要DNase消化,可用于反转录PCR、荧光定量PCR等实验。独特的裂解液迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶,植物RNA助提剂PLANTaid帮助结合多糖多酚并通过离心去除,然后裂解混合物用乙醇调节RNA结合吸附到基因组DNA清除柱,基因组DNA清除柱子同时吸附清除残留的DNA, 然后RNA被选择性洗脱滤过。滤过的RNA用乙醇调节结合条件后,RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜, 再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤, 去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质去除, 最后低盐的RNase free H20将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。

    产品特点:

    1.完全不使用有毒的Phenol,氯仿等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
    2.简捷,单个样品操作一般可在25分钟内完成,世界上最简单快速的试剂盒。
    3.独有的植物RNA助提剂可以有效结合多糖多酚,提高清除效果。
    4.独家研发成功基因组DNA清除柱技术可以有效清除gDNA残留,得到的RNA一般不需要DNase消化,可用于反转录PCR、荧光定量PCR等实验。
    5.适应性极其广泛,可以提取包括棉花、松针、冬青树叶、葡萄叶片、等100多种国内外试剂盒提取失败的样品。详细样品列表请参考公司主页产品介绍。
    6.多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.9~2.2,基本无DNA残留,可用于RT-PCR,Northern-blot和各种实验。

     
    ❖ 适用范围:
     
    适用于快速提取植物组织细胞总 RNA,使用独有基因组 DNA 清除柱技术可有效清除电泳可见 DNA 残留,RNA 可用于反转录 PCR,荧光定量 PCR 等。
     
    ❖ 试剂盒组成、储存、稳定性:
     
    试剂盒组成 保存 50 次 (RN3802)
    裂解液 RLT 室温 50 ml
    裂解液 CLB(酶液) 室温 8 ml
    裂解液 RLT Plus 室温 25 ml
    去蛋白液 RW1 室温 40 ml
    漂洗液 RW 室温 10 ml(第一次使用前请按说明加指定量乙醇)
    RNase-free H₂O 室温 10 ml
    PLANTaid 室温 5 ml
    盖因阻 DNA 清除柱和收集管 室温 50 套
    RNase-free 吸附柱 RA 和收集管 室温 50 套
     
    本试剂盒在室温储存 12 个月不影响使用效果。
     
    储存事项:
    1. 不合适的储存于低温(4℃或者 - 20℃)会造成溶液沉淀,影响使用效果,因此运输和储存均在室温下(15℃-25℃)进行。
    2. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH 值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
    ❖ 注意事项
     
    1. 所有的离心步骤均可在室温完成(4℃离心也可以),使用转速可以达到 13,000 rpm 的传统台式离心机,如 Eppendorf 5413C 或者类似离心机。
    2. 需要自备乙醇,研钵可选。
    3. 样品处理绝对不要超过基因清除柱 DA 和 RNA 吸附柱 RA 处理能力,否则造成 DNA 残留或产量降低。开始摸索实验条件时,如果不清楚样品 DNA/RNA 含量时可使用较少的样品处理量,将来根据样品试验情况增加或者减少处理量。
    4. 裂解液 RLT 和 RLT Plus 和去蛋白液 RW1 中含有刺激性化合物,操作时戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
    5. 关于 DNA 的微量残留:
       
      一般说来任何总 RNA 提取试剂在提取过程中无法完全避免 DNA 的微量残留(DNase 消化也无法做到 100% 无残留),本公司的 EASYspin Plus RNA 提取产品,由于采取了本公司独特的缓冲体系和基因阻 DNA 清除柱技术,绝大部分 DNA 已经被清除了,不需要 DNase 消化,可直接用于反转录 PCR 和荧光定量 PCR。个别特殊情况如 DNA 含量过于丰富造成残留或者要进行严格的 mRNA 表达量分析荧光定量 PCR,我们建议在进行模板和引物的选择时:
     
    1. 选用跨内含子的引物,以穿过 mRNA 中的连接区,这样 DNA 就不能作为模板参与扩增反应。
    2. 选择基因的 DNA 和 cDNA 上扩增的产物大小不一样的引物对。
    3. 将 RNA 提取物用 RNase-free 的 DNase I 处理。本试剂盒还可以用于 DNase I 处理后的 RNA 清洁 (cleanup),请联系我们索取具体操作说明书。
    4. 在步骤去蛋白液 RW1 漂洗前,直接在吸附柱 RA 上进行 DNase I 柱上消化处理。购买 DNA 酶柱上消化试剂 (货号: RN34) 前可先索取具体操作说明书。
     
    1. 仔细阅读补充说明 2,如果裂解液 CLB 效果好,可以联系我们单独订购裂解液 CLB。以后可直接订购 RN53 EASYspin Plus 多糖多酚复杂植物 RNA 快速提取试剂盒。
    ❖ 操作步骤:(实验前请先阅读注意事项)
     
    提示:→ 第一次使用前请先在漂洗液 RW 瓶加入指定量无水乙醇!
     
    1. 直接研磨法(提取简单植物样品推荐此法,但是简单样品也可以用液氮研磨法):
       
      a. PLANTAid 组织称重后取 100mg-200mg 迅速剪小块放入研钵(冰冻保存或者新鲜保存样品可直接取后称重 100mg-200mg 放入研钵),加入 10 体积(1ml)RLT 和 1 体积(100μl)PLANTAid 室温下充分研磨成匀浆。注意应该迅速研磨让组织和裂解液 RLT 立刻充分接触以抑制 RNA 酶活性。
       
      注: PLANTAid 是提取多糖多酚次级代谢产物色素含量丰富的困难样品不可缺少成分。
       
      b. 将裂解物转入离心管,剧烈摇晃振荡 15 秒,13,000rpm 离心 5-10 分钟,沉淀不能裂解的碎片和结合有多糖多酚的 PLANTAid。
       
      c. 取 480μl 裂解物上清(在不超过基因阻 DNA 清除柱能力的情况下可以取更多的上清,这样可以提高产量)转到一个新离心管。加入上清体积一半的无水乙醇
       
      (0.5 体积),此时可能出现沉淀,但是不影响提取过程,立即吹打混匀,不要离心。
       
      d. 立刻接操作步骤的步骤 3。
    2. 液氮研磨法(提取复杂,易降解样品时推荐此法):
       
      a. 取 500μl 裂解液 RLT,转入 1.5ml 离心管中,加入 50μl PLANTAid 混匀备用。
       
      b. 液氮中研磨适量植物组织成细粉后,取 50mg-100mg 细粉转入上述装有 RLT 和 PLANTAid 的离心管,立即用手剧烈振荡 20 秒,充分裂解。
       
      c. 用吸头吹打混匀帮助裂解或者剧烈涡旋震荡直到得到满意匀浆结果 (或者电动匀浆 30 秒),可以剪切 DNA,降低粘稠度和提高产量。
       
      d. 将裂解物 13,000rpm 离心 5-10 分钟,沉淀不能裂解的碎片和结合有多糖多酚的 PLANTAid。
       
      e. 取裂解物上清(在不超过基因阻 DNA 清除柱能力的情况下可以取更多的上清,这样可以提高产量)转到一个新离心管。加入上清体积一半的无水乙醇 (0.5 体积),此时可能出现沉淀,但是不影响提取过程,立即吹打混匀,不要离心。
       
      f. 立刻接操作步骤的步骤 3。
       
      注意:以上液氮研磨法用户可以根据需要加倍处理,可以提高产量。也就是使用 1ml 的裂解液 RLT 和 100μl PLANTAid 和 100mg-200mg 的样品。
    3. 将混合液 (每次小于 720μl,多可以分两次加入) 加入一个基因组清除柱中,(清除柱放入收集管中) 13,000rpm 离心 2 分钟,弃掉废液。
       
      确保离心液体全部滤过去,离心没有残留物,如有必要,可以加大离心力和离心时间。
    1. 将基因阻 DNA 清除柱放在一个干净 2ml 离心管内 (不用 RNase free 或者 DEPC 处理,一般干净的新离心管即可。也可使用 RNA 吸附柱配套的新的干净收集管),在基因阻清除柱中加 500μl 裂解液 RLT Plus,13,000rpm 离心 30 秒,收集滤液(RNA 在滤液内),用量筒移液枪估计滤液体积(通常为 450-500μl 左右,滤过时候损失体积应该减去),加入 0.5 倍体积的无水乙醇,此时可能出现沉淀,但是不影响提取过程,立即吹打混匀,不要离心。
    2. 立刻将混合液 (每次小于 720μl,多可以分两次加入) 加入一个吸附柱 RA 中,(吸附柱放入收集管中) 13,000 rpm 离心 2 分钟,弃掉废液。
       
      确保离心后液体全部滤过去,膜上没有残留,如有必要,可以加大离心力和离心时间。
     
    1. 加 700μl 去蛋白液 RW1,室温放置 1 分钟,13,000rpm 离心 30 秒,弃掉废液。
    2. 加入 500μl 漂洗液 RW(请先检查是否已加入无水乙醇),13,000 rpm 离心 30 秒,弃掉废液。加入 500μl 漂洗液 RW,重复一遍。
    3. 将吸附柱 RA 放回收集管中,13,000 rpm 离心 2 分钟,尽量除去漂洗液,以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。
    4. 取出吸附柱 RA,放入一个 RNase free 离心管中,根据预期 RNA 产量在吸附膜的中间部位加 30-50μl RNase free water(事先在 70-90℃水浴中加热可提高产量),室温放置 1 分钟,12,000 rpm 离心 1 分钟。
    5. 如果预期 RNA 产量 > 30μg,加 30-50μl RNase free water 重复步骤 9,合并两次洗脱液,或者使用第一次的洗脱液加回到吸附柱重复步骤 9 一遍 (如果需要 RNA 浓度高)。
       
      洗两遍的 RNA 洗脱液浓度高,两次洗脱合并洗脱液的 RNA 产量比前者高 15-30%, 但是浓度要低,用户根据需要选择。




     

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      Phosphorus Alters the Metabolism of Sugars and Amino Acids in Elite Wheat Grains(磷改变优良小麦籽粒的糖与氨基酸代谢)

      文献和实验图片1

      使用该产品发表的部分文章:

      1. 桃果实、花、根、叶:Isolation, characterisation and phylogenetic analysis of resistance gene    analogues in a wild species of peach (Prunus kansuensis).Canadian Journal of Plant Science,    2011, 91(6): 961-970
      2. 樱桃花、叶、颚等各部位:Over-expression of the PaAP1 gene from sweet cherry (Prunus avium    L.)    causes early floweri.Journal of Plant Physiology, 2012,Available online 1 December    2012
      3. 洋葱根、茎、蕾、叶、雌雄蕊等各部位:Cloning and Expression Analysis of A Putative B Class MADS-box    Gene of AcPI in Onion. Scientia Agricultura Sinica, 2012, 45(23):4759-4769
      4.  芜菁:Isolation and Functional Characterisation of the Genes Encoding Δ8-Sphingolipid       Desaturase from Brassica rapa. Journal of Genetics and Genomics Volume 39, Issue 1, January    2012,    Pages 47–59
      5. 芜  菁 1 :EXPRESSION, DIVERGENCE AND EVOLUTION OF THE CALEOSIN GENE FAMILY IN BRASSICA RAPA. Arch. Biol. Sci., Belgrade, 65 (3), 863-876, 2013 DOI:10.2298/ABS1303863H
      6. 番茄叶:Effect of Low Temperature Stress on the Expression of ProDH Gene and the Activities of the Proline Dehydrogenase in Leaves of Tomato Seedling. Chinese Agricultural Science  Bulletin 2012,28(10):132-135
      7. 栀子叶:Isolation of High Quality Total RNA from Gardenia jasminoides Eills.Chinese Agricultural    Science Bulletin.2012, 28(27):194-198
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      9. 油桐果实1:Selection of Reliable Reference Genes for Gene Expression Studies Using Real-Time    PCR in Tung Tree during Seed Development. PLoS ONE, 2012, 7(8): e43084
      10. 紫菜:Molecular cloning and expression analysis of ribosomal protein S7 gene from Porphyra    haitanensis. JOURNAL OF FISHERIES OF CHINA, 2011, 35(12):1814-1821
      11. 石斛:Molecular characterization of a mitogen-activated protein kinase gene DoMPK1 in Dendrobium officinale. Acta Pharmaceutica Sinica, 2012, 47 (12): 1703-1709
      12. 石斛1:ESTs Analysis Reveals Putative Genes Involved in Symbiotic Seed Germination in Dendrobium officinale. Symbiotic Germination Genes in D. officinale. August 2013 | Volume 8 | Issue 8 | e72705
      13. 大豆:RNA-seq Analysis Reveals Ethylene-Mediated Reproductive Organ Development and Abscission in Soybean(Glycine max L. Merr.). Plant Mol Biol Rep, 2012, published online: 4 Dec, 2012
      14. 大豆1:Construction of ethylene regulatory network based on the phytohormones related gene transcriptome profiling and prediction of transcription factor activities in soybean. Acta Physiol Plant, 2012, published online: 12 Dec, 2012
      15. 红花玉兰:Expression Analysis of MAwuAG in Different Organs and Developmental Stages of Magnolia wufengensis. Chinese Bulletin of Botany, 2013, 48 (2): 1–5
      16. 毛桃:Cloning and Phylogeny Analysis of PpAP2 Floral Homologous Genes in Peach. Chinese Agricultural Science Bulletin, 2013, 29(7): 99-104
      17. 五倍子:Cloning and characterisation of a phenylalanine ammonia-lyase gene from Rhus chinensis. Plant Cell Rep, 2013, published online:15 March, 2013
      18. :五倍子1:Cloning, characterization and expression of chalcone synthase from medicinal plant Rhus chinensis.J. Plant Biochem. Biotechnol. DOI 10.1007/s13562-013-0231-9
      19. 青杄 :cDNA Cloning and Bioinformatic Analysis of the sPPa1 Gene form Picea wilsonii. Plant Science Journal, 2012, 30(40): 394-401
      20. 青杄 1:cDNA Cloning and Bioinformatic Analysis of PsbO Gene from Picea wilsonii.Life Science Research, 2012, 16(3): 201-206
      21. 青杄 2:Cloning and Tissue Expression Analysis of PwPSAF in Picea wilsonii. SCIENTIA SILVAE SINICAE. Vol. 49,No. 10, Oct. 2013.
      22. 洋葱:Molecular Cloning and Transcriptional Analysis of the Putative AGAMOUS Homolog AcAG in Onion (Allium cepa. Plant Mol Biol Rep, DOI 10.1007/s11105-013-0607-y
      23. 木瓜:XsFAD2 gene encodes the enzyme responsible for the high linoleic acid content in oil accumulated in Xanthoceras sorbifolia seeds. JOURNAL ARTICLE. 2013-6-17.
      24. 木瓜1:Two novel diacylglycerol acyltransferase genes from Xanthoceras 2 sorbifolia are responsible for its seed oil content. GENE-38688; No. of pages: 9; 4C:
      25. 柑橘:Efficient auto-excision of a selectable marker gene from transgenic citrus by combining the Cre/loxP system and ipt selection. Plant Cell Rep, DOI 10.1007/s00299-013-1470-x
      26. 柑橘1:Expression Analysis of Three Phloem-specific Promoters in Transgenic Poncirus trifoliata. Acta Horticulturae Sinica. 2014, 41(1): 1–8.
      27. 柑橘2: Activation of three pathogen-inducible promoters in transgenic citrus (Citrus sinensis Osbeck) after Xanthomonas axonopodis pv. citri infection and wounding. Plant Cell Tiss Organ Cult. DOI 10.1007/s11240-013-0423-y.
      28. 茶梅花瓣:Comparison and Analysis of Methods of Extracting Total RNA from Petals of Camellia sasanqua. Chinese Agricultural Science Bulletin.2013,29(28):129-133.
      29. 栀子:Isolation of High Quality Total RNA fromGardenia jasminoides Eills. Chinese Agricultural Science Bulletin. 2012, 28(27):194-198
      30. 丹参:Genome-wide analysis and molecular dissection of the SPL gene family in Salvia miltiorrhiza. 2014 Jan;56(1):38-50. doi: 10.1111/jipb.12111. Epub 2013 Nov 20.
      31. 牡丹:Transcriptome Comparison Reveals Key Candidate Genes Responsible for the Unusual Reblooming Trait in Tree Peonies. Genes Responsible for Reblooming in Tree Peonies. November 2013 | Volume 8 | Issue 11 | e79996
      32. 东南景天:Role of sulfur assimilation pathway in cadmium hyperaccumulation by Sedum alfredii Hance. Ecotoxicology and Environmental Safety. Volume 100, February 2014, Pages 159–165.
      33. 山苍子:Identification of appropriate reference genes for normalizing transcript expression by quantitative real‑time PCR in Litsea cubeba. TECHNICAL NOTE. Mol Genet Genomics (2013) 288:727–737, DOI 10.1007/s00438-013-0785-1
      34. 木本植物:Heterologous gene silencing induced by tobacco rattle virus (TRV) is efficient for pursuing functional genomics studies in woody plants. ORIGINAL PAPER. Plant Cell Tiss Organ Cult, DOI 10.1007/s11240-013-0393-0
      35. 棉花:Analysis of sea-island cotton and upland cotton in response to Verticillium dahliae infection by RNA sequencing. Sun et al. BMC Genomics 2013, 14:852 /1471-2164/14/852.
      36. 桃子:Biochemical changes and defence responses during the development of peach gummosis caused by Lasiodiplodia theobromae. Eur J Plant Pathol (2014) 138:195–207, DOI 10.1007/s10658-013-0322-4.
      37. 桃子1:Carbohydrate metabolism changes in Prunus persica gummosis infected with Lasiodiplodia theobromae. 
      38. 海棠:The Malus crabapple transcription factor McMYB10 regulatesanthocyanin biosynthesis during petal coloration. Scientia Horticulturae 166 (2014) 42–49.
      39. 海藻:A rapid and sensitive method for field detection of Prorocentrum donghaiense using reverse transcription-coupled loop-mediated isothermal amplification. Harmful Algae 29 (2013) 31–39.
      40. 油茶:Establish a cDNA-AFLP Technology System in Camellia oleifera. Molecular Plant Breeding, 2013, Vol.11, No.5, 611-616.
      41. 亚洲百合:Transcriptomic analysis of Asiatic lily in the process of vernalization via RNA-seq. Mol Biol Rep. DOI 10.1007/s11033-014-3250-2.
      42. 毛泡桐:Dynamic expression of novel and conserved microRNAs and their targets in diploid and tetraploid of Paulownia tomentosa. Biochimie xxx (2014) 1e10.
      43. 人参:Cloning and Sequence Analysis Squalene Epoxidase Gene in Panax gin-seng. Journal of Jilin Agricultural University 2014, 36(2): 149-152,17
      44. 雪莲:Cloning and Sequence Analysis of rbcs Gene from Sasussured involucrdta Kar. et Kir. Chinese Agricultural Science Bulletin 2014, 30(15): 261-267
      45. 柑橘3:Secreted Expression of Cecropin B Gene Enhances Resistance to Xanthomonas axonopodis pv. citri in Transgenic Citrus sinensis‘Tarocco’ Acta Horticulturae Sinica 2014
      46. 菊花:Stem apex detoxification culture markedly improved severalphysiological characters of chrysanthemum ‘YUTAI’. Plant Cell Tiss Organ Cult 2014, DOI 10.1007/s11240-014-0541-1
      47. 荞麦和拟南芥:Ectopic expression of FaesAP3, a Fagopyrum esculentum (Polygonaceae) AP3 orthologous gene rescues stamen development in an Arabidopsis ap3 mutant. Gene 2014, 550(2): 200–206
      48. 油松:Differential expression of SLOW WALKER2 homologue in ovules of female sterile mutant and fertile clone of Pinus tabulaeformis. Russian Journal of Developmental Biology 2014, 45(2): 78-84
      49. 玫瑰花:Precise spatio-temporal modulation of ACC synthase by MPK6 cascade mediates the response of rose flowers to rehydration. The Plant Journal 2014, 79(6): 941–950
      50. 棉花和拟南芥:Functional characterization of GhAKT1, a novel Shaker-like K+ channel gene involved in K+ uptake from cotton (Gossypium hirsutum). Gene 2014, 545(1): 61–71
      51. 棉花和拟南芥1:Upland Cotton Gene GhFPF1 Confers Promotion of Flowering Time and Shade-Avoidance Responses in Arabidopsis thaliana. PLoS ONE 2014, 9(3): e91869. doi:10.1371/journal.pone.0091869
      52. 白杨:Poplar GATA transcription factor PdGNC is capable of regulating chloroplast ultrastructure, photosynthesis, and vegetative growth in Arabidopsis under varying nitrogen levels. Plant Cell Tiss Organ Cult 2014, DOI 10.1007/s11240-014-0536-y
      53. 毛果杨:Molecular characterization of the SPL gene family in Populus trichocarpa. BMC Plant Biology 2014, 14: 131
      54. 葛根:Molecular cloning and characterization of an isoflavone 7-O-glucosyltransferase from Pueraria lobata. Plant Cell Reports 2014, 33(7), 1173–1185
      55. 百合:Cloning and Expression Analysis of Actin Gene(lilyActin)from Lily. Acta Horticulturae Sinica 2013, 40(7): 1318–1326
      56. 百合1: Vernalization of Oriental hybrid lily ‘Sorbonne’: changes in physiology metabolic activity and molecular mechanism.Molecular Biology Reports 2014, DOI 10.1007/s11033-014-3545-3
      57. 黄鹌菜:Transcriptome Sequencing and De Novo Analysis of Youngia japonica Using the Illumina Platform. PLoS ONE 2014, 9(3): e90636. doi:10.1371/journal.pone.0090636
      58. 棉花1:Gibberellin Overproduction Promotes Sucrose Synthase Expression and Secondary Cell Wall Deposition in Cotton Fibers. PLoS ONE 2014, 9(5): e96537. doi:10.1371/journal.pone.0096537
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        /RNA同时加到吸附柱上去。如何去除DNA是第一个难点。否则会残留大量DNA。两个技术难点的没有掌握导致了国内公司包括的第二种试剂盒失败。国外公司因为没有掌握第一难点,裂解液里面没有去除多糖多酚成分,所以包括Qiagen的RNeasy plant mini kit盒子也常常不能成功提取较复杂植物RNA样品如黑加仑、冬青等植物样品。 北京艾德莱生物的研发人员经过3年的不断研发改良,针对多糖多酚植物的特点,和这两种试剂盒失败的原因,开发出了世界领先水平的RN09 EASYspin植物RNA快速提取试剂盒

      • 填补Qiagen空白的植物RNA提取试剂盒(包括多糖多酚困难样品)

        ,和这两种试剂盒失败的原因,开发出了世界领先水平的RN09 EASYspin植物RNA快速提取试剂盒。第一:采用直接过柱子方法,彻底抛弃了TRIzol苯酚,氯仿原理方法,使用无毒原料,并且添加了有自主知识产权的去除多糖多酚成分解决了多糖多酚和代谢产物对于RNA的破坏和干扰分离。第二:突破了直接过柱子的方法DNA去除的技术难点,解决了DNA残留过多问题。经过实践过程中,几十种国内外试剂盒包括Qiagen的RNeasy mini kit 提取失败的例子,包括棉花苹果等试剂盒不易提取的样品,使用北京艾德莱生物

      研选
      EASYspin Plus 植物RNA快速提取试剂盒
      ¥910