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- 库存:
120
- 供应商:
沪震生物
- 品系:
细胞系
- 组织来源:
肺癌
- 相关疾病:
见说明书
- 物种来源:
人
- 免疫类型:
见说明书
- 细胞形态:
贴壁;上皮细胞样
- 是否是肿瘤细胞:
见说明书
- 器官来源:
肺癌
- 运输方式:
干冰运输or活细胞运输
- 年限:
1-52
- 生长状态:
贴壁;上皮细胞样
- 规格:
1000000细胞/株
| 产品编号 | 名称 | 规格 | 价格 | 产品说明书 |
|---|---|---|---|---|
| HZ-H122 | A549;人非小细胞肺癌细胞 | 1×10^6 cells/瓶 | 询价 | 下载 |
细胞名称:A549 人非小细胞肺癌细胞
组织来源:肺癌
培养条件:RPMI-1640 +10% FBS
形 态:贴壁;上皮细胞样
A549细胞提供原代/传代细胞,质量保证,生长状态良好,没有细菌 真菌 支原体等微生物污染。细胞一般以T25培养瓶包装,容积75ml细胞数量可达10的6次方左右。购买方收到细胞应当马上检查,如发现细胞状态不佳或者大部分死亡情况下,须当天联系我司。得到我技术确认后免费补发一株。一周内发现细胞有污染情况,请拍照记录并与销售部联系。
A549细胞的冻存是细胞培养的基本操作,不同的实验室采用的方法略有差异,但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。我认为有以下几点需要注意:
(1)冻存前细胞状态,细胞最好在对数生长期,细胞密度适合,刚刚发生细胞融合,过密或连成片的细胞状态不好,而且消化时不容易分散;
(2)冻存的密度不宜过低,10的6次方-7次方的数量级比较好,我冻存的细胞一般T25培养瓶(5*107),一瓶冻一管(1.5ml冻存管),10cm培养皿(大概10的8次方个细胞)分成两管。
(3)A549细胞消化和吹打,切忌胰酶消化过度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入完全培养基吹打哦,不是加入冻存液再吹打。
(4)离心后加入冻存液。冻存液中FBS的用量对于肿瘤细胞株而言要求不是很严格,我从10%-90%都用过,问题不大,个人认为10%-20%可以了,能节约处就节约点嘛!另外,冻存液可以在处理细胞前配置,放在4度冰箱预冷。细胞离心后直接用预冷的冻存液重悬,移入冻存管。
(5)关于“慢冻”,传统的方法,A549细胞冻存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更长,-80度过夜,最后液氮。对于条件较好的实验室和细胞冻存数量多的实验室,推荐使用程序降温盒,内装异丙醇,在-80度并内可以逐渐降温,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。
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文献和实验问: A549细胞到底是如何形态?我见过三角形,近乎MDCK细胞形态的,还有的呈长梭形。我感觉自己的细胞好像混进了MDCK细胞。大家帮忙诊断一下,谢谢。 我培养的A549细胞 答1:
我也在养A549细胞,也来讲讲自己的经验,希望大家共同学习。我们主要是看细胞的密度,大概有80-90%铺满培养瓶底就可以传代了,时间长短不一,大概有5-7天吧,一瓶一般传3-4瓶,中间一般会有一次换液的。培养基用的是1640+10%的小牛血清+200u/ml庆大霉素。传代时先倒掉就培养基,然后用PBS洗一两次,然后再用0.25%胰酶消化(100ml培养瓶盖住表面大概要两滴管左右),可镜经下观察细胞间已出现细胞胞质回缩变圆,缝隙变大(我的细胞大概要2min左右),即可倒去消化液,加入培养基,吹打
和量化免疫细胞与肿瘤细胞之间的作用。A549肿瘤细胞(CytoLight Red荧光试剂标记)与预激活或未激活的PBMC共培养,加入Incucyte® FabFluor-488-α-CD45和Incucyte® Opti-Green试剂来标记淋巴细胞。加入PBMC 2小时后拍照显示CD45+细胞(绿色)和A549细胞(红色)之间的作用。相互作用(overlay,图示黄色mask)定量分析显示活化效应细胞与靶细胞的相互作用显著增加(结果见柱状图)。这一分析采用Incucyte® Cell
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