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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
120
- 供应商:
沪震生物
- 品系:
细胞系
- 组织来源:
乳腺
- 相关疾病:
见说明书
- 物种来源:
人
- 免疫类型:
见说明书
- 细胞形态:
贴壁;上皮细胞样
- 是否是肿瘤细胞:
见说明书
- 器官来源:
乳腺
- 运输方式:
干冰运输or活细胞运输
- 年限:
1-52
- 生长状态:
贴壁;上皮细胞样
- 规格:
1000000细胞/株
组织来源:乳腺
培养条件:1640+10% FBS
形 态:贴壁;上皮细胞样
| 产品编号 | 名称 | 规格 | 价格 | 产品说明书 |
| HZ-H321 | T-47D;人乳腺管癌细胞 | 1×10^6 cells/瓶 | 询价 | 下载 |
T-47D细胞的冻存是细胞培养的基本操作,不同的实验室采用的方法略有差异,但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。我认为有以下几点需要注意:
(1)冻存前细胞状态,细胞最好在对数生长期,细胞密度适合,刚刚发生细胞融合,过密或连成片的细胞状态不好,而且消化时不容易分散;
(2)冻存的密度不宜过低,10的6次方-7次方的数量级比较好,我冻存的细胞一般T25培养瓶(5*107),一瓶冻一管(1.5ml冻存管),10cm培养皿(大概10的8次方个细胞)分成两管。
(3)T-47D细胞消化和吹打,切忌胰酶消化过度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入完全培养基吹打哦,不是加入冻存液再吹打。
(4)离心后加入冻存液。冻存液中FBS的用量对于肿瘤细胞株而言要求不是很严格,我从10%-90%都用过,问题不大,个人认为10%-20%可以了,能节约处就节约点嘛!另外,冻存液可以在处理细胞前配置,放在4度冰箱预冷。细胞离心后直接用预冷的冻存液重悬,移入冻存管。
(5)关于“慢冻”,传统的方法,T-47D细胞冻存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更长,-80度过夜,最后液氮。对于条件较好的实验室和细胞冻存数量多的实验室,推荐使用程序降温盒,内装异丙醇,在-80度并内可以逐渐降温,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。
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